肿瘤免疫疗法是目前癌症治疗领域中最具研究前景的方法之一，相比于手术切除、放射疗法、化学疗法等传统方法，肿瘤免疫疗法具有安全、有效、低毒等优点。利用阻断剂阻断免疫检查点是免疫疗法中较为有效的一种方法。程序性死亡受体1(PD-1)是近年来研究比较成熟的免疫检查点之一。阻断PD-1与其受体PD-L1或者PD-L2的相互作用，可阻断PD-1通路介导的免疫抑制反应，包括抗肿瘤免疫反应。因此，靶向于PD-1或者其受体的阻断剂是当前制药企业及科研机构研究的一个热点。　　程序性死亡受体1(PD-1)已被确证为一个有效的药物靶标，目前研究的阻断剂大多数为单克隆抗体药物。其中，PD-1抗体纳武单抗与帕母单抗为已上市药物，用于治疗黑色素瘤与非小细胞肺癌。这类单克隆抗体药物虽具有较好的临床效果，但是同时也伴随着一些免疫相关副作用。与抗体类药物相比较，分子量较小的多肽及小分子阻断剂可以避免免疫相关的不良反应，同时还具有生产成本低、免疫原性低和较高的组织和肿瘤渗透性等优点。　　本文首先开展了靶向于PD-1多肽阻断剂的设计及评价实验。利用计算机辅助药物设计，设计了一系列靶向于PD-1的多肽阻断剂;然后利用表面等离子体共振(SPR)技术测定其与PD-1的结合亲和力，其中结合最强的多肽P5-1与PD-1的结合亲和力为0.29μM;进而通过竞争性实验验证了该多肽可以阻断PD-1与PD-L1的相互作用;多肽P5-1在细胞水平实验中可以恢复衰竭的Jurkat T细胞的免疫功能。该部分实验结果为靶向于PD-1多肽阻断剂的研究奠定了基础。　　小分子化合物作为药物具有更多的优点，但是目前还没有靶向于PD-1的小分子阻断剂的报道。本文开展了靶向于PD-1小分子阻断剂的筛选及功能验证实验。首先通过Thermal shift技术筛选靶向于PD-1的小分子阻断剂;之后利用SPR测定其与PD-1之间的结合亲和力;选取结合较强的化合物进行竞争性实验，发现化合物13、32、153、443可以阻断PD-1与PD-L1的相互作用;对化合物443进行细胞功能性验证，发现化合物443可以通过恢复Jurkat T细胞的免疫功能使Jurkat T细胞对肿瘤细胞产生一定的免疫抑制作用;并且通过Western blot实验阐明化合物443的作用机制，发现化合物443可直接作用于PD-1蛋白，抑制T细胞下游ITSM的激活，从而抑制下游一系列信号转导。本研究为后续开发靶向于PD-1的小分子阻断剂奠定了基础。