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背景:周围神经缺损损伤在外科创伤中较为常见,其修复和功能重建一直是临床上面临的一大难题。在周围神经缺损损伤治疗中较为经典的方法是自体神经移植,尽管结果较为理想,但会造成供体神经区域的功能缺失,所以在临床上无法推广。因此,寻找新的神经来源来代替自体神经引起了较多关注。近年来,组织工程的发展为我们提供了新的方法。许旺细胞(SCs)是周围神经主要的功能细胞,但是自体来源的SCs在取材方面较为困难,且在体外培养方面也存在困难,异体来源的SCs则存在免疫排斥反应的问题,这些都限制了它们在临床上的应用。人脐血间充质干细胞(HumanUmbilicalCordBloodMesenchymalStemCells,HUCBMSCs)在分离、培养、扩增等环节的成功,以及成功的诱导分化为类SCs,为组织工程修复周围神经缺损损伤的种子细胞提供了一种新的选择。目的:评价将HUCBMSCs来源的类SCs作为种子细胞,修复大鼠坐骨神经15㎜缺损损伤的效果,为HUCBMSCs在临床上治疗周围神经损伤提供必要的实验依据。方法:1.无菌条件下,收集足月产、正常胎儿的脐带血,应用肝素抗凝,使用6%高分子量羟乙基淀粉沉降红细胞,后应用人淋巴细胞分离液分离出脐血中单个核细胞,再应用Mesencult培养基对分离出的单个核细胞进行培养、纯化以及扩增,从而获得MSCs,并通过流式细胞仪对细胞表型进行鉴定;2.依次应用含β-ME+bFGF、RA、Forskolin+bFGF+PDGF-BB+NGF+Heregulin的诱导液将脐带血MSCs定向诱导分化为类SCs,并通过免疫细胞化学法,鉴定诱导后细胞的神经胶质细胞标志物S100b、GFAP、P75;3.应用-196℃液氮反复冻融振荡洗涤的方法对异体神经脱细胞处理,制备去细胞坐骨神经基膜管,修剪长度为15mm,调整类SCs密度为1×107/mL后,使用微量注射器将细胞注入去细胞基膜管中,制备成组织工程神经;4.30只SD大鼠随机分为3组,每组10只,A组:将类SCs复合去细胞神经基膜管后桥接15㎜坐骨神经缺损;B组:仅用去细胞神经基膜管桥接15㎜神经损伤;C组:坐骨神经切下15㎜后原位缝合。8周后,进行大鼠大体观察、坐骨神经功能指数测定、腓肠肌湿重测定、神经电生理功能检测、组织学染色观察等检查对神经修复情况进行评价。结果:1.分离培养出的细胞高表达CD44、CD73,低表达或不表达CD34;2.诱导后类SCs几乎都表达神经胶质细胞标志物S100b、GFAP和P75;3.通过8周的动物实验观察,脐带血MSCs来源的类SCs复合神经支架(A组)在神经再生及功能恢复上效果良好,优于单纯神经支架组(B组),较自体神经移植组(C组)差,差异显著(P<0.05)。结论:1、人脐带血间MSCs来源的类SCs能够促进大鼠15mm坐骨神经损伤的修复。2、人脐带血间MSCs来源的类SCs能够作为组织工程神经支架种子细胞的来源,且为周围神经缺损损伤修复提供了一种新的方法。