背景:肝细胞癌（HCC）是全球癌症相关死亡的第三大原因,高居我国癌症死亡率第二位。手术是肝癌根治性治疗的主要手段,但其术后5年复发转移率高达40-70%,患者5年生存率仅18%左右。术后高复发率及高转移率是HCC预后不良的主要原因,然而HCC复发转移的分子机制尚不明晰。由剪接体执行的前体m RNA（pre-m RNA）可变剪接（AS）过程是真核生物体内转录组和蛋白质多样性的重要机制,然而剪接体是如何被运送到核内发挥功能的尚不清楚。多项研究证明异常AS在肿瘤中频繁发生,影响肿瘤的发生发展及复发转移,然而其在HCC复发转移中发挥作用的分子机制知之甚少。KIF2C是驱动蛋白家族-13（Kinesin-13）中最具代表性的成员之一,参与微管解聚、纺锤体组装、染色体分离、DNA双链断裂片段迁移等生命活动,是多种癌症的标记分子,并与淋巴浸润、转移、预后不良相关。通过对TCGA数据库及肝癌临床标本分析,发现KIF2C与HCC患者的复发、血管侵犯、肝癌病理分化级别、无疾病生存率等高度相关,表明KIF2C促进HCC的复发转移。分析TCGA数据库发现,不同于KIF2C的经典功能,与其共表达的前500个基因最聚集于剪接体。由此我们大胆猜测,KIF2C促进HCC复发转移的分子机制可能与异常AS相关。目的:本课题旨在解析KIF2C促进肝癌复发转移的分子机制,探索其是否通过调控AS来提高HCC细胞的侵袭转移能力,为具有高侵袭、高转移特性的HCC诊疗策略、药物联用方案开发及诊疗手段选择提供可靠的理论依据。方法:（1）通过对TCGA数据库及肝癌临床标本中KIF2C的表达量分析、Transwell、划痕等体外功能实验及人肝癌裸鼠肝原位移植瘤模型分析,检测KIF2C与HCC复发转移的相关性;（2）通过免疫沉淀、质谱分析、免疫共沉淀、实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹、免疫荧光技术等检测与KIF2C相互作用的蛋白及两者的相互调控关系;（3）通过转录组测序分析、PCR-琼脂糖凝胶电泳、RNA结合蛋白免疫沉淀、免疫荧光、基质胶降解实验等检测KIF2C对AS的调控作用,确定其下游靶点及作用机制。结果:（1）KIF2C在有血管侵犯、新肿瘤形成及HCC复发患者中表达升高,并与HCC病理分化级别正相关,与HCC患者无疾病生存率负相关;（2）KIF2C与剪接因子PUF60结合,敲降KIF2C,PUF60核内分布变少,质内变多;（3）分别敲降KIF2C、PUF60,均检测到FNBP1发生外显子跳跃形式的AS,且具有临床学意义;（4）PUF60与FNBP1 pre-m RNA 9-10号内含子剪接位点结合促进FNBP1 10号外显子的包含,此种剪接形式称为FNBP1＿L;（5）敲降KIF2C、PUF60、FNBP1＿L,HCC细胞迁移、侵袭、侵入性伪足生成、细胞外基质（ECM）降解能力均下降。结论:本课题研究发现在HCC高复发、高转移患者中异常高表达的KIF2C通过其新功能——调控剪接因子PUF60入核,协同调控下游靶点FNBP1＿L的增多,促进HCC细胞侵入性伪足的生成及对ECM的降解,从而增强HCC细胞的迁移、侵袭能力,进而促进HCC的复发和转移。本研究丰富了HCC复发转移的机制,为复发转移性HCC预后标志物及临床药物开发、联用开拓了新思路。