【摘 要】
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背景:干细胞疗法在临床中风研究领域中被认为是一种有前途的疗法。最近的多项研究报道,自1980年代以来,缺血性中风的发病率呈上升趋势,尤其是在较年轻的群体中。在成年人牙齿
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背景:干细胞疗法在临床中风研究领域中被认为是一种有前途的疗法。最近的多项研究报道,自1980年代以来,缺血性中风的发病率呈上升趋势,尤其是在较年轻的群体中。在成年人牙齿中,牙髓干细胞(DPSCs)和牙周膜干细胞(PDLSCs)是比较容易获得的两种干细胞。但是,目前还没有报道详细叙述在对缺血性中风的治疗方案中,使用DPSCs或PDLSCs治疗是否为最合适的一种方法,也尚未深入研究这两种干细胞对中风的治疗作用和相关机制。方法:本研究通过体外培养获得了DPSCs和PDLSCs,并将两种干细胞进行神经向诱导分化,后通过RT-PCR,免疫荧光,Giemsa染色和western blotting等方法评估了DPSCs和PDLSCs的分化能力。与此同时我们还进行了转染实验,以证实在过表达或敲除信号分子后DPSCs和PDLSCs在分化为神经样细胞过程中的相关机制。随后,我们建立了大鼠脑缺血模型。将使用PKH26标记的DPSCs和PDLSCs通过尾静脉注射的方法移植到大鼠模型体内,以追踪干细胞迁移结果。最后,观察两种细胞的修复效果,并通过TTC染色,免疫荧光和改良神经系统严重程度评分(m NSS)等方法检测并进行比较,以评估神经功能的恢复情况。结果:对多种实验结果进行比较后显示,PDLSCs与DPSCs相比具有更高的神经向分化能力。免疫荧光研究表明,在对两种细胞进行神经向诱导后,PDLSCs中的神经元分化标记Thy-1(主要在细胞质中)的表达高于DPSCs,其他神经细胞特异性基因也显示出相似的趋势,这一点已通过Western blot证实。在此过程中,Notch和Wnt信号通路分别被抑制和激活。最后,我们建立了局灶性脑缺血动物模型来检测PDLSCs和DPSCs对缺血性疾病的修复作用。结果表明,与DPSCs注射组相比,PDLSCs注射组能够看到更加明显的PKH26标记的荧光信号。PDLSCs与DPSCs相比可能能够更有效地促进神经功能的恢复。结论:因此,PDLSCs是一种自体来源的具有理想生物学特性的成人间充质干细胞(MSCs),并且可能是临床治疗应用的理想候选者。总之,使用PDLSCs治疗中风疾病可增强神经功能的恢复,并为干细胞治疗局灶性脑缺血提供基础。
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