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卵巢的生理调控过程涉及到多种细胞因子和信号通路,卵巢颗粒细胞的增殖、分化和凋亡与卵泡的发育、成熟乃至闭锁是紧密相关的。microRNAs是非编码小RNAs,参与多种生理功能调控,但在猪卵泡发育过程中的功能研究较少,依据本课题组前期小鼠卵巢microRNAs的深度测序结果及小鼠卵泡和颗粒细胞中的初步研究结果,本课题有针对性地选定对小鼠卵泡发育以及颗粒细胞生长、功能有显著影响的三种microRNAs(miR-130a/16/381),以进一步研究它们在猪卵巢颗粒细胞中的表达以及对颗粒细胞增殖、凋亡和分泌激素的影响。研究结果如下：(1)RT-PCR检测了miR-130a、miR-16及miR-381在猪颗粒细胞中的内源表达情况,结果显示这三种miRNAs在猪颗粒细胞中均有表达。(2)microRNAs过表达对猪卵巢颗粒细胞的细胞周期、增殖和细胞凋亡的影响。结果显示这三种miRNAs分别过表达后对细胞凋亡没有显著性影响。过表达miR-130a可以显著性地促进细胞的增殖(P<0.001),处于G1期的细胞数量显著性地减少(P<0.05),处于S期的细胞数量显著性地增多(P<0.01)；过表达miR-16可以显著性地抑制细胞的增殖(P<0.001),PCNA的mRNA水平显著降低(P<0.05),处于G2期的细胞数量显著性下降(P<0.01)；过表达miR-381显著性地抑制细胞增殖(P<0.01),PCNA的mRNA水平显著性地降低(P<0.01),但不影响细胞的周期分布。(3)microRNAs过表达对猪卵巢颗粒细胞的雌激素和孕激素分泌的影响。结果显示,这三种1nicroRNAs分别过表达后均能显著性促进颗粒细胞分泌雌激素以及孕激素(P<0.01)。Real time-PCR检测类固醇激素合成相关基因的mRNA水平,结果显示,过表达rniR-130a显著性下调StAR(P<0.001)和CYP11A1 (P<0.05)的表达,显著性上调CYP19A1 (P<0.05)的表达,但对HSD3β mRNA水平没有显著性的影响；过表达miR-16显著性下调StAR (P<0.001)和CYP11A1 (P<0.05),对CYP19A1以及HSD3β的1mRNA水平却没有显著性的影响：过表达miR-381显著性下调StAR(P<0.001)、显著性上调HSD3β(P<0.05)的表达,CYP11A1以及CYP19A1的1mRNA水平没有显著性影响。结果表明,miR-130a/16/381对猪卵巢颗粒细胞生长以及分泌激素的功能有影响,结果为进一步深入探究这三种microRNAs在猪卵泡发育和成熟过程中的功能奠定了基础。