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目的:张力蛋白同源的第10号染色体缺失的磷酸酶(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)作为一个具有双重特异性磷酸酶活性的抑癌基因,通过调控过磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,Pl3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号通路的平衡,参与细胞凋亡、细胞周期阻滞和细胞迁移等细胞生命活动调节,发挥其细胞增殖调控作用。PTEN的表达异常在癌症、神经发育障碍、心血管功能障碍等疾病的发病机制中起着至关重要的作用。细胞自噬是普遍存在于真核生物中的一种自我消化过程,既可以抑制肿瘤发生的机制,又可以在肿瘤生长过程中,为肿瘤细胞提供能量。因此自噬对肿瘤的存活既有积极作用又有消极作用。细胞自噬相关因子ATG7作为重要的自噬蛋?,参与多种生理病理的调节过程。然而,ATG7与PTEN作为影响肿瘤发生发展的重要因子,其二者间的关系报道较少。本研究探索ATG7与PTEN表达的关联性,为临床治疗PTEN表达异常引起的相关疾病提供新的思路。方法:1.利用免疫组化技术,在5例正常组织和45例癌组织中检测ATG7和PTEN的表达水平。2.通过免疫共沉淀观察ATG7与PTEN的结合情况。3.利用CRISPR/Cas9技术构建靶向基因编辑质粒,通过细胞转染及抗生素筛选分别构建PTEN稳定敲除和ATG7稳定敲除的人子宫内膜腺癌细胞株KLE、人结肠癌细胞HCT116、人胚胎肾细胞HEK293、肝癌细胞HepG2。4.通过Western Blot方法检测ATG7和PTEN蛋白的表达水平,分析PTEN的表达与ATG7表达的关系。结果:1.免疫组化结果表明,相对于正常组织,癌组织中ATG7中高表达,PTEN表达为弱阳性或阴性。2.免疫共沉淀结果显示,ATG7通过与PTEN结合的方式,调控PTEN的表达。3.在体外培养的肿瘤细胞中,ATG7负调控PTEN的表达。结论:ATG7负调控PTEN的表达。