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CXCR4和CXCR7对人食管癌细胞系生物学行为的影响目的：研究趋化因子受体CXCR4和CXCR7在人食管癌细胞系中的表达水平并探讨其在食管癌增殖、侵袭及凋亡中的作用及机制。方法：应用定量real-time PCR (qRT-PCR)、Western blot和流式细胞检测技术等方法检测人食管癌Eca109细胞、CaEs-17细胞中CXCR4和CXCR7的表达水平,并使用永生化人食管上皮细胞(HEEC)作为对照；采用慢病毒介导的RNA干扰技术分别转染CXCR4和CXCR7表达水平相对较高的人食管癌Eca109细胞系,获得CXCR4和CXCR7表达下调的Eca109/shCXCR4和Eca109/shCXCR7细胞系；研究下调CXCR4和CXCR7的表达水平后对人食管癌Eca109细胞增殖、侵袭和凋亡等生物学特性的影响,并探讨其相关作用机制。结果：与HEEC细胞相比较,人食管癌Eca109细胞和CaEs-17细胞中均存在CXCR4和CXCR7表达上调现象且表达水平有差异；将CXCR4和CXCR7基因表达水平分别下调后,CCK-8实验结果显示,人食管癌Eca109细胞的增殖能力明显降低；Transwell小室实验结果显示,人食管癌Eca109细胞的侵袭能力显著下降；而使用流式细胞检测技术对Eca109细胞凋亡和细胞周期分布进行检测后发现,CXCR4和CXCR7基因表达水平的变化对细胞的凋亡和周期分布没有影响；Western blot结果显示,下调CXCR4和CXCR7的表达水平可以抑制RhoA、Rac-1和Cdc42蛋白的表达,同时抑制Akt和ERK蛋白的磷酸化活化；使用CXCL12刺激人食管癌Eca109细胞并再次行Western blot检测上述蛋白的表达水平,结果显示,下调CXCR4和CXCR7表达水平后可明显抑制上述蛋白的上调；用Akt和MEK信号通路抑制剂阻断相关信号通路后行Western blot发现,RhoA、Rac-1和Cdc42蛋白的表达水平是随Akt蛋白磷酸化活化水平的增加而增加的。结论：CXCR4和CXCR7在人食管癌细胞系中存在表达上调现象。下调CXCR4和CXCR7基因可以抑制食管癌Eca109细胞的增殖和侵袭能力,而对细胞凋亡及细胞周期没有影响。下调CXCR4和CXCR7基因表达水平后,可明显抑制CXCL12对Eca109细胞的趋化反应,这种抑制作用可能是通过PI3K/Akt信号通路下调RhoA、Rac-1和Cdc42蛋白的表达水平而实现的。CXCR4和CXCR7基因沉默对人食管癌Eca109细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响目的：研究人食管癌Eca109细胞的CXCR4和CXCR7基因下调后,对其在裸鼠皮下接种移植瘤生长的影响。方法：应用慢病毒稳转法构建Eca109/shCXCR4细胞、Eca109/shCXCR7细胞和Eca109/shCtl细胞,建立人食管癌裸鼠皮下移植瘤模型；观察比较CXCR4和CXCR7基因下调对移植瘤生长曲线的影响；用免疫组织化学染色法(CD34)标记移植瘤内新生血管,计数MVD,比较下调CXCR4和CXCR7基因对移植瘤血管形成的影响；采用Western blot法比较移植瘤内CXCL12水平的变化。结果：下调CXCR4和CXCR7基因后人食管癌Eca109细胞裸鼠皮下移植瘤的生长速度明显变慢,且体积明显变小；下调CXCR4和CXCR7基因后,移植瘤内MVD明显低于对照组及野生细胞组所成移植瘤内MVD；移植瘤中CXCL12的表达水平亦随CXCR4和CXCR7表达水平的下调而下调。结论：CXCR4和CXCR7基因沉默后能抑制食管癌的生长,其对肿瘤生长的抑制作用可能是通过抑制肿瘤血管形成和抑制CXCL12的分泌而实现的。CXCR7在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义目的：探讨CXCR7在人食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法：选择154例胸段食管鳞状细胞癌标本,49例正常食管鳞状上皮组织标本：肿利用免疫组织化学染色方法检测食管癌组织及正常食管鳞形上皮组织中CXCR7蛋白的表达情况,并结合临床资料进行分析。结果：正常食管鳞状上皮组织中的CXCR7蛋白阳性表达率为6.1%(4/49)肿瘤组织中的CXCR7阳性表达率为76.0%(116/154)；T1期CXCR7的阳性表达率为50.0%(6/12),T2期为63.4%(26/41),T3期为82.1%(78/95),T4期为100.0%(6/6),差异有统计学意义(p=0.009)；无淋巴结转移者CXCR7的阳性表达率为63.7%(58/91),淋巴结转移<3个者CXCR7的阳性表达率为90.9%(40/44),淋巴结转移数>3个者的阳性表达率为94.7%(18/19),差异有统计学意义(p<0.001);pTNM分期Ⅰ期者CXCR7阳性表达率为41.7%(7/12),Ⅱ期者69.8%(60/86),Ⅲ期者92.3%(48/52),Ⅳ期者75.0%(3/4)差异有统计学意义(p<0.001)。单因素分析显示,患者的性别(p=0.030)、年龄(p=0.049)、肿瘤的浸润深度(p<0.001)、淋巴结转移情况(p<0.001),患者的pTNM分期(p<0.001)及CXCR7的表达情况(p<0.001)与患者的预后相关；多因素分析显示肿瘤浸pTNM分期(p=0.017)和CXCR7表达情况(p=0.006)是食管鳞状细胞癌患者生存的独立预后因素。结论：CXCR7蛋白的表达水平与食管鳞状细胞癌患者的复发、转移及预后密切相关,推测CXCR7表达上调可能是食管鳞状细胞癌患者的潜在不良预后因素。