【摘 要】
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本文以拟南芥组成型表达的profilin异型体(PFN1和PFN2)为研究对象。首先研究了其对G-actin聚合的影响。结果显示:在稳定的聚合条件下,profilin的加入导致G-actin聚合临界浓度的
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本文以拟南芥组成型表达的profilin异型体(PFN1和PFN2)为研究对象。首先研究了其对G-actin聚合的影响。结果显示:在稳定的聚合条件下,profilin的加入导致G-actin聚合临界浓度的明显升高,但PFN1的加入引起临界浓度升高的幅度较PFN2更大,解离常数(Kd为0.67μM)较PFN2(Kd为1.523μM)更小,这就说明在体外PFN1可以结合并封存更多的G-actin;同时,我们分析了profilin异型体与其另一重要配体PLP的结合特性。结果显示,profilin异型体与PLP的结合能力亦存在明显的差异:PFN1与PLP的解离常数Kd值较小、为14.85μM;而PFN2的Kd值大得多,为86.57μM,说明PFN1与PLP的结合能力明显比PFN2更强。此外,我们还比较了GFP融合蛋白与野生profilin在PLP结合能力上的差异,以确定GFP是否会对小分子量的profilin造成生化特性的影响。结果说明,GFP的融合在一定程度上导致了profilin与PLP解离常数的升高,但其影响较小,并没有造成profilin与PLP结合特性的根本改变。
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