【摘 要】
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目的:探讨在胃癌腹膜侵袭转移中靶向调控PRL-3的内源性micro RNA分子mi R-495基因上游Cp G岛甲基化对胃癌细胞的PRL-3基因表达影响。方法:培养2株正常胃黏膜上皮细胞系(GES-1
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目的:探讨在胃癌腹膜侵袭转移中靶向调控PRL-3的内源性micro RNA分子mi R-495基因上游Cp G岛甲基化对胃癌细胞的PRL-3基因表达影响。方法:培养2株正常胃黏膜上皮细胞系(GES-1和HFE-145)和4株转移潜能不同的胃癌细胞系(MKN28,SGC7901,MKN45,BGC823),用Western Blot方法检测细胞中PRL-3蛋白水平,用q RT-PCR技术检测细胞中mi R-495表达情况,通过甲基化特异性PCR(MSP)及亚硫酸氢钠测序法(bisulfite genomic sequencing,BSP)检测mi R-495基因启动子甲基化水平,Transwell小室实验检测4种肿瘤细胞侵袭及转移能力。利用不同浓度(0u M、1u M、5u M、10u M)的DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂胞苷-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-dc)处理后,37℃、5%CO2的孵箱继续孵育48小时,同样利用以上方法测定PRL-3蛋白水平、mi R-495表达情况、mi R-495基因启动子甲基化水平以及肿瘤细胞侵袭及转移能力的变化。结果:胃癌细胞在DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂胞苷-2’-脱氧胞苷去甲基化处理后,mi R-495表达均明显增加,且明显抑制了PRL-3蛋白及m RNA的表达,Transwell侵袭迁移实验表明,胃癌细胞在去甲基化处理后,侵袭和迁移能力均明显下降。结论:在胃癌腹膜侵袭转移中靶向调控PRL-3的内源性micro RNA分子mi R-495基因上游Cp G岛甲基化使mi R-495表达下调,进而导致胃癌腹膜转移中PRL-3
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