目的 Hespintor是本课题组在2005年利用抑制性消减杂交（suppression subtractive hybridization,SSH）技术,从肝母细胞瘤细胞系Hep G2中筛选得到的一种新的Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子（serine proteinase inhibitors,Serpins）,2006年12月确定参考序列。前期研究已证实Hespintor重组蛋白可在体外明显抑制肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭,对肝癌裸鼠移植瘤皮下生长具有良好的抑制作用,并初步阐明其分子机制。索拉菲尼（Sorafenib）是一种新型多靶向肿瘤治疗药物,是目前临床治疗进展期肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）的主要药物,虽然在一定程度上可以延长患者生存期、延缓疾病进展,但其临床应答率有限,且治疗后期容易出现药物耐受。本研究拟通过对肝癌裸鼠移植瘤模型分组给药,进一步观察重组Hespintor联合Sorafenib对肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用,并基于RNA-Seq探究其分子调控机制。方法 建立肝癌裸鼠移植瘤模型并分组给药,观察肿瘤生长状况。给药四周后取瘤体,通过测量肿瘤体积和重量,计算抑瘤率,通过HE染色观察肿瘤的组织病理学改变,来评价Hespintor抑制肿瘤原位生长及肝转移作用。利用Western blot检测瘤体组织中MMP2、MMP9及Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达水平,并基于组织RNA-Seq筛选Hespintor作用靶点基因并构建调控网络。结果 重组Hespintor对MHCC97-H细胞的皮下生长具有良好的抑制效果,联合用药的治疗效果显著强于单独用药。获得Hespintor作用瘤组织的显著差异表达靶点基因10个,最终构建出一个Target m RNA-pathway可视化调控网络,主要集中于细胞迁移、炎症反应、细胞行为、神经调控、代谢调节、细胞通讯等功能。结论 重组Hespintor联合Sorafenib治疗肝癌裸鼠皮下移植瘤的效果明显,并且线粒体凋亡途径极有可能是Hespintor诱导细胞凋亡机制之一。Hespintor作用机制涉及多个信号通路,不止胞外抑制uPA活性一种抗肿瘤机制。