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T-2毒素是由镰刀菌产生的单端孢霉烯族化合物中毒性较强的一种真菌毒素,是最常见的污染粮食类作物的几种主要毒素之一。由于其毒性比较大且广泛分布于自然界,对人类健康及畜牧业构成了极大危害,故建立一种高效、快速、灵敏的检测方法来检测其含量是非常有必要的。喹赛多虽然曾被当作安全、高效的饲料添加剂来使用,但考虑到其通过食物链累积作用对人体可能产生的不良影响,所以也需要建立相应的检测方法来监测其在食用动物组织中的残留量。因脱二氧喹赛多被确定为喹赛多在动物体内代谢的残留标志物,本研究就是以此为基础对喹赛多进行药物的残留研究。本论文旨在建立检测T-2毒素的抗体芯片免疫分析法和检测脱二氧喹赛多的化学发光免疫分析法。①在合成检测抗原T-2-HS-BSA后,使用微量点样毛细管将其点阵于琼脂糖修饰的基片上,使用Cy5标记的二抗,建立间接竞争抗体芯片免疫分析法,用于检测T-2毒素在小麦等粮食作物中的残留。本研究在优化点样浓度、单抗工作浓度、封阻物质及浓度和荧光二抗工作浓度后建立了标准曲线,其检测范围(IC20-IC80)为0.005ng/mL-9.58ng/mL,半抑制浓度(IC50)为0.22ng/mL,最低检测限(LOD)为0.001ng/mL。同时初步建立间接竞争酶联免疫分析法(ELISA)标准曲线,其检测范围为0.27ng/mL～11.82ng/mL, IC50为1.77ng/mL,LOD为0.14ng/mL。两者相比,抗体芯片检测法最低检测限降低了2个数量级和检测范围加大了2个数量级。在此基础上进行加标回收实验,并运用ELISA.抗体芯片和高效液相色谱法(HPLC)三种方法对加标样品进行了检测,回收率基本达到分析检测的要求。该方法简单、快速、高灵敏度、高通量、上样量小,适用于粮食作物中真菌毒素残留监测。②采用鲁米诺-过氧化氢发光系统,使用HRP标记的二抗,建立了间接竞争酶联化学发光免疫分析法,用于检测脱二氧喹赛多(Cy4)在肉鸡胸肌及肝脏组织中的残留。首先使用Cy4多克隆抗体初步摸索并建立化学发光检测标准曲线,其检测范围为0.017～10.34IC50为0.42μg/mL,LOD为5.82ng/mL。然后在获得Cy4单克隆抗体的基础上进一步详尽地优化了各项反应参数,如包被液种类、包被原工作浓度、单抗工作浓度、封阻物质、浓度及时间、标品稀释液中DMSO浓度、竞争反应时间、酶标二抗使用浓度、酶与底物反应时间等,最终建立标准曲线,其检测范围为0.027ng/mL～67.67ng/mL,IC50为1.36ng/mL,LOD为0.007ng/mL o两者相比最低检测限降低了3个数量级。与其结构类似物及代谢物的交叉反应率均比较低,表明其特异性好,同时单抗的特异性明显好于多抗。加标回收实验所得回收率及变异系数均达到分析检测要求。最后还对实际样品进行了检测,结果与HPLC检测法有良好的相关性。整个实验过程操作简单、快速、灵敏度高、特异性好、检测范围宽,能够用于动物兽药残留检测分析。