沙鼠前脑缺血再灌注后脑组织HSP20和EPO的表达变化及神经保护作用

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目的:观察沙鼠前脑短暂性缺血再灌注后,HSP20与EPO在脑组织中的表达,探讨二者的相关性和保护机制,并评估它们的临床应用前景。方法:(1)动物分组:将健康雄性蒙古沙鼠45只,随机分为三组:正常对照组(normal group)(n=5),假手术组(sham-operated group)(n=20)和脑缺血再灌注组(I/R group)(n=20)。其中假手术组和脑缺血再灌注组又分为四个亚组:六小时组(6h),一天组(1d),三天组(3d)和七天组(7d)。(2)模型制作:除了正常对照组之外其他动物都用3%戊巴比妥麻醉后做颈总动脉区皮肤切口,分离双侧颈总动脉。脑缺血再灌注组予以夹闭双侧颈总动脉十分钟后再恢复灌注血流。假手术组仅分离双侧颈总动脉不予夹闭。在对应的时间点断头处死各组动物。(3)HE染色观察沙鼠前脑组织的病理变化。(4)免疫组织化学染色观察HSP20和EPO的表达情况。(5)所有统计分析均用SPSS15.0统计软件包完成。结果:(1)HE染色:正常对照组和各假手术组的沙鼠前脑组织形态结构没有明显的变化;脑缺血再灌注组根据时间点的不同可见胶质细胞肥大、增生,细胞和细胞间质水肿,神经元坏死。(2)免疫组化染色HSP20的表达:正常对照组和各假手术组的沙鼠前脑组织中偶有HSP20的表达。缺血再灌注损伤后HSP20的表达上调,于第三天达到高峰,后开始下降至七天时仍高于正常组和假手术组(与正常组和各假手术组比较p<0.05,不同时间点比较p<0.05)。(3)免疫组化染色EPO的表达:正常对照组和各假手术组的沙鼠前脑组织偶可见EPO的表达,在脑缺血再灌注后表达明显增高,于第三天达到高峰,后开始下降至七天时仍明显高于正常组和假手术组(与正常组和各假手术组比较p<0.05,不同时间点比较p<0.05)。(4)HSP20和EPO在沙鼠缺血再灌注前脑组织中的表达趋势相同呈正相关的关系,Pearson系数为0.777,p<0.05。结论:(1)缺血再灌注的沙鼠脑组织中HSP20表达升高并有神经保护作用;(2)缺血再灌注的沙鼠脑组织中EPO表达升高并且通过不同的机制减轻缺血再灌注所导致的脑损伤;(3)缺血再灌注沙鼠脑组织中HSP20和EPO的表达呈正相关的关系。
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