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目的:
观察温热处理的朗格汉斯细胞(LC)对T细胞增殖能力的影响,探讨温热诱导机体免疫的机制。
方法:
选择6至8周C57BL/6j雌鼠,分离并采用免疫磁珠纯化技术获得胸腹部皮肤LC。将LC分成四组,分别用37℃、39℃、41℃、43℃进行不同温度处理30分钟。选择6至8周的BALB/cj雌鼠,分离其脾T淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化技术分别纯化CD4+和CD8+两群细胞。实验组:将培养3天后已成熟的LC用X射线照射去增殖,分别按照1∶10的比例与CD4+、CD8+T细胞混合培养;阳性对照组:CD3、CD28抗体刺激等量两群T细胞;阴性对照:等量两群T细胞未予处理。2天后用alamarblue染色检测各组T细胞增殖情况。采用单因素方差分析比较不同温度处理后的LC对CD4+、CD8+T细胞的刺激增殖能力。
结果:
LC能够刺激CD4+和CD8+T淋巴细胞的增殖(P<0.05),温热处理后的LC对CD8+T细胞的刺激能力明显增强,差异有统计学意义(P<0.05),其中41℃组>39℃组,两组差异无统计学意义(P>0.05)。温热处理后的LC对CD4+T细胞刺激能力无明显变化,组间差异无统计学意义(P>0.05)。
结论:
温热可以提高LC刺激CD8+T细胞增殖的能力,且一定程度上呈温度依赖性。温热在诱导皮肤免疫中可能主要通过CD8+T淋巴细胞发挥作用。