多药耐药性(multidrug resistance，MDK)是指由一种药物诱发，同时对其他多种结构和作用机制完全不同的抗癌药物产生交叉耐药的一种现象。P—糖蛋白(P—glycoprotein，P—gp)的过表达是造成MDR的主要原因之一。P—gp抑制剂是通过抑制P—gp的转运活性从而增加抗肿瘤药物在P—gp过度表达的肿瘤细胞内的积蓄的一类化合物。多年来寻找和发现新的P—gp抑制剂一直是肿瘤研究方面的热点之一。药物在体内的生物转化主要经肝细胞微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系进行代谢，许多药物可对细胞色素P450酶系活性有抑制或诱导作用，当与其他需经CYP450代谢的药物联合应用时，会影响这类药物的代谢，从而产生药物相互作用。1416是本实验室的一个全新的化合物。本实验的目的是建立一个P—gp抑制剂的筛选平台，研究1416对P—gp功能和表达的影响，以及体外1416对P450酶系活性的影响。 实验采用了Caco-2单层细胞模型来研究1416在Caco-2单层细胞上的转运特性。结果显示，1416在Caco-2上的转运呈现明显的双向差异性，并且1416逆转了硫酸长春碱(vinblastine，VBL，一种已知的P—gp底物)在Caco-2上转运的双向差异性，结果表明Caco-2上的P—gp可能参与了1416的跨膜运输过程，并且是通过抑制P—gp的活性逆转了VBL转运的双向差异性，说明1416可能为P—gp抑制剂。 实验采用了K562和K562/ADM细胞株来研究1416对P—gp功能和表达的影响。MTT法检测1416对长春碱(VBL)和阿霉素(adriamycin，ADM)的K562/ADM细胞的细胞毒作用的影响；在胞内罗丹明123(rhodanmine123，Rh123)积累和外排实验中，使用流式细胞仪技术研究1416对K562/ADM细胞上P—gp功能的影响：半定量RT—PCR．技术检测了1416对K562/ADM细胞上P—gp在mRNA水平表达的影响。实验结果显示：10μM 1416能显著的增加Rh123在K562/ADM细胞内的蓄积，并且可以抑制Rh123的外排。RT—PCR的结果显示，1416并不会影响P—gp mRNA的表达。结果说明，1416是一种新的P—gp抑制剂，并且是通过抑制P—gp的功能来发挥抑制作用的。 研究1416对细胞色素P450酶系活性的影响，将1416与肝脏微粒体在体外孵育，测定酶活性。结果表明，1416可以诱导P450酶系中红霉素-N—脱甲基酶的活性，抑制细胞色素P450，细胞色素b5和氨基吡啉-N—脱甲基酶的活性。