DEUP1的表达及其启动子甲基化在肝细胞癌中的临床意义

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目的1.探讨肝细胞癌中DEUP1的表达及其临床意义。2.探讨肝细胞癌中DEUP1启动子甲基化状态与肝癌患者临床病理特征之间的关系,并分析DEUP1启动子甲基化状态与蛋白表达之间的关系。方法1.收集郑州大学第一附属医院2016年1月至2016年12月行手术切除的60例肝细胞癌和配对癌旁组织标本,术后病理明确诊断为肝细胞癌。2.采用实时荧光定量PCR(qPCR)及蛋白质印迹法(western blot)检测60例肝细胞癌和配对癌旁组织中DEUP1的表达水平,分析其蛋白表达水平与临床病理特征之间的关系,并利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析DEUP1 mRNA表达水平与患者总体生存率之间的关系。3.利用甲基化数据库MethHC预测肝细胞癌及癌旁组织中DEUP1启动子甲基化状态,并利用重亚硫酸盐测序法(BSP)检测60例肝细胞癌和配对癌旁组织中DEUP1启动子甲基化状态,分析其与临床病理特征之间的关系。4.统计分析DEUP1启动子甲基化程度与其蛋白表达之间的相关性。结果1.60例肝细胞癌组织中DEUP1 mRNA和蛋白的相对表达量为0.00152±0.00036、0.054±0.026,癌旁组织中DEUP1 mRNA和蛋白的相对表达量为0.00273±0.0095、0.266±0.088,统计分析表明DEUP1 mRNA和蛋白在肝细胞癌组织中的表达显著低于配对癌旁组织。2.DEUP1蛋白在肝细胞癌组织中的表达与患者的临床病理特征之间的相关性分析表明,DEUP1蛋白表达水平与TNM分期和肿瘤分化程度有关。Kaplan-Meier Plotter分析表明DEUP1 mRNA高表达患者总体生存率高于低表达患者。3.60例肝细胞癌组织中DEUP1启动子甲基化比率为(76.6±13.9)%,癌旁组织中DEUP1启动子甲基化比率为(15.9±10.0)%,统计分析表明肝细胞癌组织中DEUP1启动子甲基化程度明显高于配对癌旁组织。DEUP1启动子甲基化状态与患者的临床病理特征之间的相关性分析表明,DEUP1启动子甲基化状态与TNM分期和肿瘤分化程度有关。4.肝细胞癌组织中DEUP1启动子甲基化和蛋白表达的相关性分析结果显示,DEUP1启动子甲基化程度与其蛋白表达水平呈负相关。结论1.DEUP1在肝细胞癌组织中表达明显低于配对癌旁组织。2.DEUP1在肝癌组织中的表达与肝癌患者的TNM分期和肿瘤分化程度相关,DEUP1 mRNA高表达患者总体生存率高于低表达患者。3.肝细胞癌组织中DEUP1启动子甲基化程度明显高于配对癌旁组织,甲基化程度与肝癌患者的TNM分期和肿瘤分化程度成相关。4.肝细胞癌组织中DEUP1启动子甲基化程度与其蛋白表达水平呈负相关。
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