中药复方多糖的提取方法优化及对雏鸡免疫功能的影响

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中药中的许多成分可以增强动物机体的免疫功能,其中多糖是中药免疫增强剂中的主要活性物质。目前,中药复方多糖提取方法众多,常用的提取方法有溶剂提取法、酸提取法、碱提取法、微波法和超声波辅助提取法等。各种方法的提取工艺不同,对于多糖的提取率也不同,因此,根据中药的组成成分,选择合适的提取方法是中药多糖提取的关键。本文利用响应面(RSM)法研究了超声波法提取中药复方多糖的最优条件,并且将此最优条件下提取的复方中药多糖配成三个不同浓度的组方添加于雏鸡的基础日粮中,以研究其对雏鸡免疫功能的影响及作用机理。将300只1日龄雏鸡随机分成5组,即第Ⅰ组(对照组)、第Ⅱ组(0.04%黄芪多糖组)、第Ⅲ组(0.02%复方多糖组)、第Ⅳ组(0.04%复方多糖组)、第Ⅴ组(0.08%复方多糖组),每组60只,试验期为42d。于试验第14、21、28、35、42d,分别从每组中随机取10只鸡采血并剖杀,进行特异性免疫、非特异性免疫、免疫器官指数和黏膜免疫等相关指标的测定。试验结果如下:1.响应面(RSM)优化的超声波法提取复方多糖采用响应面优化的超声波法提取复方多糖的最佳条件:料液比为1:20,超声时间40min,提取温度80℃,超声功率360W,复方多糖提取率为17.4735%。2.中药复方多糖对雏鸡特异性免疫功能的影响按照血凝抑制(HI)试验方法,检测鸡的ND抗体滴度、淋巴细胞增殖活性和蛋白质含量。结果显示,在21d时,0.04%复方多糖组的ND抗体滴度、淋巴细胞增殖活性和蛋白质含量与对照组之间差异极显著(P﹤0.01),与0.04%黄芪多糖组比较差异极显著(P﹤0.01)。中药复方多糖能够显著提高机体免疫应答的速度,可以更早地刺激动物产生有效保护抗体,在雏鸡的早期生长阶段,对细胞免疫具有一定的刺激作用。3.中药复方多糖对雏鸡非特异性免疫功能的影响试验结果显示,在28d时,0.04%复方多糖组的溶菌酶含量、碳廓清试验与对照组之间差异极显著(P﹤0.01),与0.04%黄芪多糖组比较差异显著(P﹤0.05)。结果表明,中药复方多糖对雏鸡中溶菌酶含量和巨噬细胞的吞噬能力有一定的影响,可以提高早期雏鸡巨噬细胞的活性,增强非特异性免疫的能力。4.中药复方多糖对雏鸡免疫器官功能的影响试验结果显示,在28、35d时,0.04%复方多糖组和0.08%复方多糖组的胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数与对照组之间差异极显著(P﹤0.01),与0.04%黄芪多糖组比较差异极显著(P﹤0.01)。结果表明,中药复方多糖在一定程度上可以促进雏鸡的免疫器官的发育,增强雏鸡的免疫力。5.中药复方多糖对雏鸡黏膜免疫的影响试验结果显示,在21、28、35d时,0.04%复方多糖组的黏膜抗体水平与对照组之间差异极显著(P﹤0.01),与0.04%黄芪多糖组比较差异不显著(P﹥0.05)。结果表明,中药复方多糖能够诱导雏鸡产生一定的黏膜免疫反应,有效加强家禽局部免疫力。试验证实,0.04%复方中药多糖组、0.08%复方中药多糖组对于雏鸡免疫功能调节作用较好且基本相近,说明该复方多糖的免疫增强作用有最适浓度。因此,确定0.04%复方中药多糖为最优剂量。
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