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目的:研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)诱导HepG2 细胞survivin的表达与DADS 介导HepG2 细胞G2/M 期阻滞的关系,探讨DADS 诱导HepG2细胞survivin 表达的机制。
方法:MTT 法检测细胞的生长活性;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR 测定survivin mRNA 表达的变化。Western blot 检测survivin、ERK1/2 和p-ERK1/2的表达。
结果:MTT结果表明DADS呈浓度依赖性的抑制HepG2细胞增殖,其中25μmol/L浓度的DADS处理细胞6 h对细胞增殖无抑制作用。Western blot检测结果显示,DADS可以诱导HepG2细胞survivin的表达。RT-PCR结果显示DADS影响HepG2细胞survivin mRNA的表达。流式细胞术结果显示25 μmol/L浓度组在6 h发生G2/M期阻滞不明显,12 h开始明显;200 μmol/L浓度组在6 h就出现G2/M期阻滞,48 h最明显。ERK1/2阻断剂PD98059抑制DADS诱导survivin表达的作用。
结论:
1. DADS 诱导HepG2 细胞survivin 的表达可能是种早期现象并与DADS 介导HepG2 细胞G2/M 期阻滞无关。
2. DADS 诱导HepG2 细胞survivin 的表达可能与ERK1/2 信号通路有关。