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目的：临床上对血友病B的治疗主要使用替代疗法，即输注重组合成或从血浆中纯化的FIX达到治疗效果。替代疗法可以有效地治疗和防止急性出血，可是仍然不能防止关节损伤的发生，而且一些病人在反复输注下还会产生中和性抗体、治疗依从性差等问题导致治疗失败。 本课题将采用一种独特的体外细胞介导的基因治疗新策略，改善血友病B的出血表型，期望彻底根治该遗传缺陷性疾病。 方法：通过对FIX定点突变，构建血小板特异性整合素蛋白αⅡb启动子调控下的慢病毒质粒，并用该载体包装的慢病毒感染经分离的FIXnull小鼠骨髓造血干细胞，然后将该细胞注射入经X射线致死剂量辐照处理的血友病B受体小鼠体内，观察骨髓移植后小鼠造血干细胞是否能在小鼠骨髓中重建、增殖并分化生成表达FIX的血小板以及促进止血来提高FIX的活性。 结果：体外细胞实验结果中：Weston Blot结果表明构建的FIX、突变型FIX/338L和FIX/AAL蛋白条带大小正确；ELISA、活性测定结果显示：与野生型 FIX相比，突变型 FIX/338L和FIX/AAL的hFIX活性依次成倍递增。血友病B小鼠体内实验结果表明：骨髓移植后，野生型FIX和突变型FIX338L受体小鼠的血小板内成功储存了FIX蛋白，表明慢病毒介导的血小板特异性表达了FIX蛋白。 结论：体外细胞实验中初步探索了突变型hFIX活性比野生型有更显著地优越性，受体血友病B小鼠骨髓移植后经基因修饰过的造血干细胞能在小鼠骨髓中重建、增殖并分化生成表达FIX的血小板以及促进止血来提高FIX的活性。该基因治疗策略可行、有效。将作为临床研究的基础，如果临床研究结果证明该方法的有效性、可行性及安全性，则将为血友病B的治疗提供新的方法，为病人的治疗提供新的选择，有可能大幅降低病人在现行治疗方法下的痛苦和其他不足之处，具有极大的潜在社会效益。