三种蜈蚣藻多糖的提取分离及结构研究

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蜈蚣藻是一种广泛分布于我国沿海的大型经济海藻,属于红藻门海膜科。蜈蚣藻可供食用、制胶,也可供药用,其性咸寒,具有清热解毒驱虫之功效,可用于治疗喉炎,蛔虫病。多糖作为蜈蚣藻的主要成分之一,近几年的研究结果表明其具有较好的抗凝血、抗病毒、抗肿瘤等多种生物活性,显示出了开发成药物的潜在价值。本文以赛氏蜈蚣藻(Grateloupia setchellii kylin,GlpS),青岛蜈蚣藻(Grateloupia Qingdaoensis,GlpQ)和带形蜈蚣藻(Grateloupia Turuturu,GlpT)为原料,通过不同的提取、分离和纯化技术得到了多种粗多糖组分。通过多种化学方法和现代仪器分析手段,对粗多糖的理化性质进行了分析比较。并对带形蜈蚣藻的冷水和热水提粗多糖进行分离纯化,确定了其中两种纯化组分GTC22和GTH42的基本结构。三种蜈蚣藻藻体粉末依次经冷水、热水和热碱提取,得到九种粗多糖组分。其中三种冷水提多糖分别命名为GSC、GCQ和GTC;三种热水提多糖分别命名为GSH、GQH和GTH;三种碱提多糖分别命名为GSA、GQA和GTA。对九种粗多糖的理化性质和相关结构进行研究,结果表明:九种粗多糖的冷水提组分都是以半乳糖为主要组成的硫酸多糖;热水提和碱提组分都含有葡萄糖;青岛蜈蚣藻的冷水提和热水提组分还含有少量的葡萄糖醛酸。冷水提组分GTC和GSC硫酸基含量较高(20.69%和20.85%)。冷水提和热水提多糖蛋白含量较低,碱提组分蛋白含量相对较高,其中GTA蛋白含量最高为14.76%。九种粗多糖重均分子量均较大,其中GSH分子量最小为316.9KD,GQA分子量最大为534.5KD。红外光谱的结果进一步证实了蜈蚣藻多糖主要为连有硫酸基的半乳聚糖。利用QFF阴离子交换色谱对带形蜈蚣藻的冷水提组分GTC和热水提组分GTH进行了纯化,获得7种多糖组分GTC1、GTC2、GTC3、GTH1、GTH2、GTH3和GTH4,并对它们的理化性质进行了分析。结果表明主要组分GTC2和GTH4总糖含量最高分别为69.9%和59.9%,硫酸基含量分别是21.7%和22.8%。随后采用Sephacryl S-400凝胶色谱对GTC2和GTH4进行二次纯化,获得组分GTC22和GTH42,它们在Shodex Opal SB-804HQ柱上均显示单一对称峰,分子量分别为44KD和404.8KD。最后,利用不同的化学分析方法和波谱学方法对GTC22和GTH42组分的结构进行了研究,包括样品的脱硫,甲基化分析,红外光谱,核磁共振波谱和气质联用分析等。研究结果表明结果表明GTC22和GTH42都是以β构型为主并存在少量α构型的半乳聚糖,GTC22多糖链的连接方式主要为1→3,1→4连接,并存在少量的1→3,4连接;GTH42多糖链的连接方式为1→4连接。硫酸基的取代位置可能位于C6位。本文对三种蜈蚣藻进行了粗多糖的提取和理化性质分析,并对带形蜈蚣藻多糖的结构进行了研究,确定了两种硫酸半乳聚糖组分的基本结构,为进一步研究蜈蚣藻多糖的构效关系提供了重要的信息,也为我国蜈蚣藻资源的开发利用提供了参考和借鉴。
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