乙肝病毒感染不同状态下树突状前体细胞亚群表达的研究

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目的:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的持续感染与HBV感染时机体免疫能力低下,不能产生有效的针对HBV的特异性细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)反应,从而不能有效的彻底清除HBV有关。树突状细胞(dendritic cells, DCs)是一种最具潜能的专职抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APC),诱导T淋巴细胞的增殖,在增强或调节细胞介导的免疫反应中起着决定性作用,是目前发现的唯一能激活未致敏的初始型(Naive)T细胞的APC。HBV感染者DCs的相关研究目前愈来愈受到众多学者的关注,本课题拟研究HBV感染不同状态下外周血来源DCs前体细胞亚群(myeloid dendritic cell, mDC和plasmacytoid dendritic cell, pDC)的变化特点,探讨HBV感染慢性化的免疫机制。  方法:采集15例健康人和72例HBV感染者外周静脉抗凝全血,利用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)4色分析法检测外周血DCs前体细胞亚群,mDC的特征性标记为 Lineage-HLA-DR+CD11c+, pDC的特异性标记为Lineage-HLA-DR+CD123+;运用固相放免法定量检测血清HBV标志物(HBsAg、抗-HBs、抗-HBs.IgM、HBeAg、抗-HBe、 HBcAg、抗-HBc、抗-HBc.IgM);运用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,对HBV感染者的外周血进行乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus DNA,HBVDNA)的测定。15例健康体检者列为对照组;72例HBV感染者(包括HBV携带者48例、慢性乙肝患者24例):(1)按HBeAg表达的不同分为HBeAg阳性组和HBeAg阴性组。(2)按HBVDNA定量分为HBVDNA阳性组和HBVDNA阴性组。  结果: HBeAg阳性组pDC(0.10±0.06%)占外周循环白细胞的比例显著低于HBeAg阴性组(0.23±0.12%)和健康对照组(0.25±0.14%)(P=0.008);HBeAg阳性组mDC/pDC比值(3.54±2.48)显著高于HBeAg阴性组(1.49±1.30)和健康对照组(1.64±1.31)(P=0.04);HBeAg阳性组、HBeAg阴性组和健康对照组三组间 mDC占外周循环白细胞的比例无显著性差别(P=0.439)。HBVDNA阳性组外周血 pDC(0.17±0.14%)占外周循环白细胞的比例低于 HBVDNA阴性组(0.20±0.09%)和健康对照组(0.21±0.14%),但差异不显著(P=0.092)。HBVDNA阳性组、HBVDNA阴性组和健康对照组三组间mDC占外周循环白细胞的比例、mDC/pDC比值的差异也不明显,统计分析未见显著性(P=0.543,P=0.183)。  结论:1. HBV感染慢性化与HBV感染者外周血DC前体细胞亚群的比例失调有关。2. pDC可能在打破免疫耐受,清除 HBV方面发挥作用。3. HBV感染慢性化除了与外周血DC前体细胞亚群的频率有关,还可能与DC的表型和功能损害有关,有待做进一步的相关研究。
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