【摘 要】
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随着农药的广泛应用,其环境危害也越来越受到人们的重视。氟虫腈作为新一代的苯基吡唑类杀虫剂,主要用于卫生及农作物害虫的防治。目前,关于氟虫腈的水生生物毒性研究主要集中于对低等水生生物急性毒性研究,而对于高等水生生物,如水中鱼类的研究较少。鱼类作为人类的主要食物,又处在食物链底端,是生态系统中的重要生物,可见农药对鱼类毒性研究及评价工作的重要。质谱成像具有原位、无需标记、可同时对组织表面的多种化合物空
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随着农药的广泛应用,其环境危害也越来越受到人们的重视。氟虫腈作为新一代的苯基吡唑类杀虫剂,主要用于卫生及农作物害虫的防治。目前,关于氟虫腈的水生生物毒性研究主要集中于对低等水生生物急性毒性研究,而对于高等水生生物,如水中鱼类的研究较少。鱼类作为人类的主要食物,又处在食物链底端,是生态系统中的重要生物,可见农药对鱼类毒性研究及评价工作的重要。质谱成像具有原位、无需标记、可同时对组织表面的多种化合物空间分布进行分析以及样本制备过程简便等特点,在环境、生物、化学、临床医学等领域具有广泛应用。本论文结合常压基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱成像(AP-MALDI-MSI)技术,通过直接对生物组织切片样本进行扫描,获得切片中物质成分分布的方法,对氟虫腈暴露的斑马鱼体内磷脂的代谢变化进行研究。我们对基质种类、质谱测试参数等进行了系统的优化,获得了最佳成像条件如下:斑马鱼切片厚度10μm、使用1,5-二氨基萘(DAN)作为基质、激光步长100μm、激光能量10-60%(SHIMADZU’s notation)、激光斑点直径为3(40μm)、激光累加次数200次、检测电压1.75kV。利用上述条件对氟虫腈暴露的斑马鱼整体切片进行成像分析,获得了m/z 600-950范围内的化学指纹谱图及其特定m/z磷脂的成像图。运用ROI(Region of Interest)方法对成像质谱图进行了数据统计处理。成像结果表明:氟虫腈暴露与未暴露斑马鱼的磷脂具有显著差异,主要为磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰肌醇(PI)类物质,包括:PC(34:2)、PE(18:0/22:6)、PS(18:0/22:6)、PI(18:1/20:4)等。实验结果证明质谱成像技术可以从整体动物水平观察氟虫腈暴露诱导的体内代谢物分布的变化,为农药在动物体内的毒理研究及相关代谢分析提供了新的方法。
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