目的在前期体外实验的基础上,体内实验研究小檗碱对皮肤鳞状细胞癌A431裸鼠移植瘤的体积、重量、增殖及凋亡的影响。通过检测凋亡相关蛋白的表达情况,阐明小檗碱抑制皮肤鳞状细胞癌的作用及其可能抑制机制,为治疗提供新的理论依据。方法对A431细胞进行细胞培养,裸鼠背部皮下注射皮肤鳞状细胞癌A431细胞系建立移植瘤模型;适应性饲养3周后,根据瘤体大小将裸鼠模型随机分为4组(每组5只):对照组(腹腔注射生理盐水),低剂量组(腹腔注射小檗碱10mg/kg),中剂量组(腹腔注射小檗碱20mg/kg)和高剂量组(腹腔注射小檗碱25mg/kg),将对照组设为阴性对照组;经不同浓度的小檗碱处理后,连续5周,每周检测移植瘤体积、重量,并计算抑瘤率;倒置显微镜观察移植瘤组织HE染色细胞形态;免疫组化法检测Ki67表达水平,观察移植瘤细胞的增殖能力;TUNNEL实验检测棕黄色阳性凋亡细胞数,观察移植瘤细胞的凋亡情况;荧光定量PCR法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3和Ezrin m RNA表达水平;Western blotting实验检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3和Ezrin蛋白表达水平,反映细胞的凋亡与侵袭的能力;用统计软件SPSS 22.0对不同浓度组与对照组数据进行统计分析。结果不同浓度小檗碱作用下,皮肤鳞状细胞癌裸鼠移植瘤模型生长指标不同。随着小檗碱浓度的升高,肿瘤体积逐渐减小(均P<0.01),重量逐渐减轻(均P<0.01),抑瘤率逐渐增加,具有统计学意义。移植瘤组织HE染色表明,随着小檗碱浓度的增加,肿瘤细胞坏死的面积、程度、范围随之增加,提示小檗碱可以促进移植瘤细胞的坏死。免疫组化结果表明,随着小檗碱浓度的增加,Ki67的表达水平明显下降,提示小檗碱可以抑制裸鼠A431移植瘤细胞的增殖,与对照组相比,各组均具有统计学意义(P<0.01)。TUNNEL实验可知与对照组相比,随小檗碱浓度增加,组织的棕黄色凋亡细胞逐渐增加,表明小檗碱可以促进裸鼠A431移植瘤的凋亡(低剂量组P<0.05,中剂量组、高剂量组均P<0.01)。荧光定量PCR方法可知与对照组相比,随着药物剂量的增加,凋亡蛋白Bax m RNA相对表达量低剂量、中剂量无统计学意义(P>0.05),高剂量表达明显增加(P<0.01);与对照组相比,Bcl-2 m RNA相对表达量逐渐减弱(均P<0.01);Caspase-3 m RNA相对表达量与对照组相比,低剂量组无统计学意义(P>0.05),中剂量组、高剂量组表达增加(中剂量组P<0.05,高剂量组P<0.01);与对照组相比,Ezrin m RNA相对表达量低剂量、中剂量无统计学意义(P>0.05),高剂量表达增加(P<0.01)。Western blotting实验结果显示,与对照组相比,小檗碱浓度逐渐增加后,Bax蛋白表达逐渐增强(均P<0.01),Bcl-2蛋白低剂量组无统计学意义(P>0.05),中剂量组、高剂量组表达逐渐减弱(P<0.01),Caspase-3蛋白逐渐增强(均P<0.01),Ezrin蛋白逐渐减弱(均P<0.01)。结论在一定浓度范围内,小檗碱通过抑制皮肤鳞状细胞癌A431裸鼠移植瘤细胞的增殖及促进皮肤鳞状细胞癌A431裸鼠移植瘤细胞凋亡作用,进而有效抑制皮肤鳞状细胞癌A431裸鼠移植瘤生长及抑制移植瘤细胞存活,其机制可能与小檗碱上调Bax、Caspase-3的表达,同时下调Bcl-2、Ezrin的表达有关。