MMP-10在非小细胞肺癌组织表达及与外周血CK19 mRNA相关性研究

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目的研究基质金属蛋白酶MMP-10在非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤组织中的表达与NSCLC病理类型、组织分化程度、临床分期、淋巴结转移等临床病理指标的关系,以及与NSCLC患者外周血中CK19 mRNA的相关性。方法本研究运用免疫组织化学染色技术和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-timePCR)。36例NSCLC患者术前准备检查开始前,前臂浅静脉穿刺抽取外周静脉血5ml,并于术后取用手术切除之肿瘤组织标本(包括瘤旁正常肺组织)。另同法同量抽取11例健康人及19例肺部良性疾病患者(未接受过支气管镜或穿刺细胞学检查)外周静脉血作为对照组。肿瘤组织标本及瘤旁正常肺组织用免疫组化染色技术检测MMP-10表达;NSCLC患者及肺部良性疾病患者和健康人对照组外周静脉血运用real-time PCR技术检测CK19mRNA表达。MMP-10组织表达数据以“-、+”记取,阳性细胞数小于25%为(-),25-50%为(+),50-75%为(++),大于75%为(+++)。外周静脉血CK19 mRNA表达以GAPDH mRNA表达为内参照,采用相对定量法取得数据Nck19=2-ΔCt,(ΔCt=Ctck-CtGAPDH)。全部数据采用SPSS 12.0统计软件包建立数据文件并进行统计学分析处理。结果MMP-10阳性表达位于NSCLC肿瘤细胞胞浆。NSCLC中MMP-10阳性表达率为44.4%(16/36),瘤旁正常肺组织中未见MMP-10表达。NSCLC肿瘤组织中MMP-10表达水平与临床病理指标的关系:MMP-10表达与NSCLC癌组织分化相关(Gamma Value=0.685,Fisher’exact test P=0.002,P<0.01),组织分化越差,MMP-10表达越强;MMP-10表达与NSCLC的TNM临床分期相关(Gamma Value=0.584,Fisher’exact test P=0.008,P<0.01),TNM临床分期越高、越趋向晚期,MMP-10表达越强;MMP-10表达与NSCLC淋巴结转移密切相关(Fisher’exact test x2=9.706 P=0.014 P<0.05),有淋巴结转移者NSCLC肿瘤组织中MMP-10表达较强。MMP-10在NSCLC肿瘤组织中表达与NSCLC肿瘤组织鳞癌或腺癌组织分型无关(Fisher’exact test x2=2.284、P=0.093 P>0.05),与NSCLC患者年龄分组无关(Fisher exact probabilities in 2×2 table P=0.741,P>0.05),与NSCLC患者性别无关(Fisher exact probabilities in 2×2 table P=0.731,P>0.05)。NSCLC肿瘤组织的MMP-10表达与患者外周血中CK19 mRNA高水平检出呈正相关(rs=0.796,P<0.01),MMP-10较高表达提示循环中CK19 mRNA较大量的存在,提示患者血循环中肿瘤细胞播散、肿瘤微转移的潜在性。同时,real-time PCR检测肺部良性疾病患者和健康人外周血CK19mRNA的数据显示非恶性肿瘤人群常规穿刺浅静脉所获静脉血也有CK19低水平检出,该检出水平系临床常态因素作用所致,与NSCLC患者的高水平检出有本质区别(Z良性vs患者=-5.666 P<0.01;Z健康vs患者=-4.322 P<0.01)。结论1 MMP-10在NSCLC肿瘤组织中有较高表达,在癌旁正常肺组织中不表达。2 MMP-10在NSCLC肿瘤组织中表达越强,NSCLC患者临床分期越晚,癌组织分化越差,越可能存在淋巴结转移,循环血中越可能高水平检出CK19 mRNA。3 NSCLC肿瘤组织中MMP-10表达的检测对更好地把握NSCLC的转移等生物学特性、判断预后、提供合理必要的治疗等具有重要意义。
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