论文部分内容阅读
目的：电化学沉积法中不同的电化学参数可制备形成不同空间结构的矿化胶原涂层。本实验尝试通过观察MC3T3-el前成骨细胞的黏附、增殖和分化状况,分析电化学沉积的矿化胶原涂层对前成骨细胞的影响及其机制,并探讨有利于成骨的电化学参数。方法：在电化学沉积法中选用不同参数制备钛表面矿化胶原涂层,以扫描电镜观测表面形貌。在矿化胶原涂层及HA涂层、纯钛对照组表面培养MC3T3-el前成骨细胞。在培养24h和72h时行MTS检测,分析细胞黏附和增殖情况。培养24h时,以扫描电镜观察涂层表面细胞的形态和黏附情况。在培养一周和两周时,通过Western-Blotting法检测成骨前体细胞ALP、COL-1的表达水平,分析比较不同涂层对细胞分化能力的促进作用。结果：1、前成骨细胞在各涂层上培养24h、72h时,其MTS值均逐渐增长,说明细胞在涂层表面发生了增殖反应。矿化胶原涂层的MTS值最高,且与纯钛组存在显著性差异(P<0.01),表明矿化胶原涂层能显著促进细胞增殖。2、扫描电镜观察显示前成骨细胞在培养24h时可在各涂层表面生长。在致密型矿化胶原涂层组,细胞伸展良好并伸出了伪足,固定在材料表面,生长情况较其他组更优。3、Western-Blotting检测：成骨前体细胞在相应基板表面培养一周时多孔型矿化胶原涂层和致密型矿化胶原涂层ALP、COL-1表达程度均高于纯钛组,且结果有显著性差异；此外,致密型涂层组ALP多于多孔型涂层组,并具有显著性差异,而两者的COL-1表达水平无显著差异。两周时,多孔型矿化胶原涂层、致密型矿化胶原涂层及纯钛组ALP表达水平基本无差异,多孔型涂层组及致密型涂层组COL-1表达水平均显著高于纯钛组,但却略低于培养一周时。结论：基于矿化胶原涂层修饰的钛植入体能显著促进成骨前体细胞MC3T3-el的黏附、增殖和分化。其中致密型矿化胶原涂层效果更加理想。