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目的:大血藤(Sargentodoxae caulis)来源于木通科植物大血藤 Sargentodoxa cuneat a (Oliv.) Rehd. et Wils 的干燥藤茎,具有清热解毒、活血、祛风止痛等功效。课题组前期研究表明大血藤中三萜皂苷类为主要活性成分,本文选择前期分离得到的两个新的三萜皂苷类成分为指标,进行对照品制备工艺优化和含量测定方法建立,为大血藤药材质量标准的制定提供实验依据。 方法:选择 8种大孔吸附树脂,以吸附量和解吸率为指标,筛选出对大血藤药材中2 种三萜皂苷类成分(大血藤皂苷 A 和 B)吸附效果最佳的大孔吸附树脂,优化得到最佳的富集和纯化工艺。对大血藤药材进行质量标准的完善和提高:1.增加TLC鉴别方法,指标成分为特征性成分大血藤皂苷 A和 B;2.增加 HPLC含量测定法,定量指标为大血藤皂苷 A 和 B;3.对水分、灰分、浸出物等检查项进行测定。 结果:HPD100吸附树脂对大血藤皂苷 A和 B有较好的吸附和解吸性能,最佳富集和纯化工艺为:生药质量浓度为 0.25kg/L,生药与树脂比例为 1.5:1(kg/L),洗脱程序:蒸馏水洗脱 6BV,再用 50%乙醇洗脱,收集 5BV即可。含量测定方法:色谱条件:ColumnAQ C18(4.6 mm×250 mm, 5μm),流动相甲醇-水-磷酸( 49:51:0.1),流速 1.0 ml/min,柱温 3 0℃,检测波长:210 nm;供试品制备方法:45 ml 70%乙醇回流提取 30 min;大血藤皂苷 A和 B的标准曲线分别为 Y=124862X-36 76.5( R2=0.9998)和 Y=121654X+2733.7(R2=0.9996),大血藤皂苷 A和 B分别在0.39~3.86 μg和 0.33~3.34 μg呈现良好线性关系。采用建立的方法对分别采自安徽黄山、祁门、天柱山、太平畈共 12批大血藤药材进行含量测定,结果表明大血藤皂苷 A和 B的含量范围分别为 0.11%~0.36%和 0.17%~0.30%。所有批次的大血藤药材水分含量均低于 9.0%,总灰分均低于 2.5%,酸不溶性灰分均低于 1. 0%,醇溶性浸出物均大于 11.5%。 结论:建议 2015版《中国药典》大血藤质量标准项下增加 TLC 鉴别方法,指标成分为大血藤皂苷 A和 B;增加 HPLC含量测定法,以干燥品计,大血藤药材中大血藤皂苷 A和 B的含量应分别不低于 0.10%和 0.15%。