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背景与目的肝细胞肝癌(hepataocellular carcinoma, HCC)是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,具有发病率高、预后差、侵袭性强等特点。深入研究肝癌发生发展的分子机制,试图为肝癌的诊治提供新的思路。MicroRNA(miRNA)是一类大小约为19-25bp的非编码单链小分子RNA,在不破坏mRNA稳定性的前提下通过与靶标基因mRNA 3’UTR完全或不完全互补配对,进而抑制或阻断靶基因翻译。miRNA具有高度时序性、保守性、组织特异性的特点,单一miRNA可调控多个靶基因,同时也可能一个靶基因受到多个miRNA的调控。通过大量肝癌组织与正常肝组织miRNA表达谱的比较发现,其中有一部分]miRNA表达上调,有一部分表达下调,上调的miRNA可能起着促癌基因的作用,而表达下调的miRNA则可能起着抑癌基因的作用。筛查肝癌患者的miRNA谱,发现与正常肝组织对比,miRNA-30b、-30c、-30e等表达明显下调,特别是在已经发生转移的肝癌组织中,下调更甚,这提示miRNA-30家族表达下调与肝癌的形成可能有一定的联系。目前miRNA-30家族成员在肝癌中的具体作用机制研究较少。其中,家族成员之一miRNA-30a-5p在其他肿瘤中常见报道,因此我们挑选miRNA-30a-5p为研究对象,检测其对肝癌细胞SMCC-7721增殖、凋亡、侵袭转移能力的影响。方法1.采用RT-qPCR检测miRNA-30a-5p在肝癌组织中与正常肝组织中的表达差异：2.采用RT-qPCR检测miRNA-30a-5p在肝癌细胞株中与正常肝细胞株中的表达差异；3.采用转染技术过表达肝癌细胞株内miRNA-30a-5p的表达水平；4.采用CCK-8、流式细胞术、Transwell迁移侵袭实验对miRNA-30a-5p进行体外功能分析,观察过表达miRNA-30a-5p后肝癌细胞株的生物学行为变化；5.采用裸鼠成瘤实验对miRNA-30a-5p进行体内功能分析,观察过表达miRNA-30a-5p后肝癌细胞对裸鼠成瘤的影响；6.采用生物学信息技术预测miRNA-30a-5p的靶标基因,Western Blot技术进行初步验证。结果1.通过RT-qPCR分别检测48例手术肝癌组织、相应癌旁组织标本及10例正常肝组织标本中miRNA-30a-5p的表达,发现miRNA-30a-5p在肝癌组织中的相对表达量(0.31367±0.0568)低于癌旁肝组织(0.61226±0.0954)、正常肝组织(1.0733±0.0412),差异具有统计学意义(p<0.05),RT-qPCR分别检测7种肝癌细胞株SMCC-7721、Huh7.0、 HepG2、HCCLM3、HCCLM6、MHCC-97H、MHCC-97L及正常肝细胞株L02中miRNA-30a-5p的表达,发现miRNA-30a-5p在7种肝癌细胞株的相对表达量均低于正常肝细胞株,差异有统计学意义(p<0.05)；2.通过转染miRNA-30a-5p mimics入肝癌细胞株SMCC-7721细胞,CCK-8实验发现miRNA-30a-5p过表达后可以抑制SMCC-7721细胞的增殖能力(P<0.05),流式细胞术显示miRNA-30a-5p过表达促进了细胞凋亡,细胞周期出现了S期阻滞,Transwell迁移侵袭实验表明,miRNA-30a-5p过表达可以抑制SMCC-7721细胞的体外迁移、侵袭能力(p<0.05)；3.通过裸鼠成瘤实验,观察到肝癌细胞SMCC-7721在转染miRNA-30-5p后,裸鼠皮下肿瘤的生长明显减缓,与空质粒转染组、空白组相比较,肿瘤的大小、质量减少,差异有统计学意义(P<0.05),生物信息学技术预测miRNA-30a-5p的可能靶基因,并利用western blot技术初步验证了DNA甲基化转移酶3A (DNA methltransferase 3A)可能是miRNA-30a-5p的靶基因。结论miRNA-30a-5p可抑制肝癌细胞增殖、促进其凋亡,减弱其转移、侵袭能力。