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目的： 检测多柔比星（Doxorubicin,DOX）作用下的K562白血病细胞株的凋亡情况，细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平及羰基还原酶1（Carbonyl reductase1,CBR1）mRNA的表达水平，为研究羰基还原酶（Carbonyl reductases,CBRs）与蒽环类药物(Anthracyclines,ANTs)代谢的关系提供一定的实验依据。 方法： 1、K562白血病细胞在含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中，并置于37℃含5%CO2的培养箱中悬浮培养，观察细胞生长情况； 2、取对数生长期的K562细胞，将其随机分成6组，分别加入DOX，使终浓度分别为0，0.313，0.625，1.25，2.5，5.0μg/ml，在12h、24h、48h作用时间点，用CCK-8方法检测各组K562细胞的增殖情况； 3、用ROS检测试剂盒，通过流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测不同浓度DOX作用48h后K562细胞内的ROS水平； 4、Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒在流式细胞仪上定量检测不同浓度DOX作用48h后K562细胞的凋亡比例； 5、实时定量PCR技术（Real-time PCR,RT-PCR）检测不同浓度的DOX作用于K562细胞48h后，细胞内CBR1 mRNA的相对表达量。 结果： 1．K562细胞的存活率随DOX浓度的增加及作用时间的延长而降低，呈现一定的浓度依赖性及时间依赖性，差异有统计学意义（p＜0.05）。 2．0.313，0.625，1.25，2.5μg/ml DOX处理相同时间（48h）后的细胞内ROS水平相对于对照组分别是：(119.73±9.45)%、(147.65±6.72)%、(167.78±3.30)%、(158.39±4.82)%。实验组细胞内ROS水平均较对照组明显增加，且随浓度增加，ROS水平也随之增加，差异有统计学意义（p＜0.05）。2.5μg/ml DOX实验组的ROS水平虽较对照组明显增加，但与1.25μg/ml DOX实验组差别无统计学意义（P=0.076）。 3．DOX作用48h后，0，0.313，0.625，1.25μg/ml DOX实验组K562细胞凋亡率分别为(8.73±0.62)%、(26.01±1.71)%、(36.09±3.55)%、(47.89±3.94)%，细胞凋亡率随着药物处理浓度的增加而增高，各组间差异有统计学意义（p＜0.05）。 4．RT-PCR结果显示，0，0.313，0.625，1.25μg/ml不同浓度DOX处理48h后， K562细胞株内CBR1 mRNA表达相对量分别是：(0.75±0.08)、(1.46±0.26)、(1.66±0.43)、(1.47±0.08)。实验组mRNA表达相对量明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），但不同实验组之间mRNA表达水平的差异无统计学意义（P＞0.05）。 5．在48h时间点，CBR1 mRNA的相对表达量与细胞内ROS水平及细胞凋亡率无明显相关。 结论： 1．DOX能抑制K562细胞的增殖，且有浓度及时间依赖性。但长时间、高浓度的药物作用并不能提高DOX的细胞毒作用，提示我们临床中要选择合适的药物浓度及作用时间，在保证疗效基础上尽量减小其副作用。 2．在一定时间，一定浓度范围内，K562细胞内的ROS水平随DOX药物浓度增大而升高，在此过程中细胞的凋亡率与ROS水平相关。 3．DOX可上调K562细胞株中CBR1 mRNA的表达。