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目的意义：肺癌的发病与死亡近10年来一直居恶性肿瘤之首位，严重威胁着人类的健康。且80％以上的肺癌患者确诊时已属晚期，全身化疗为主的综合治疗成为主要治疗方法。化疗不仅有效率非常有限，而且作为一种非特异性细胞毒治疗方法，在杀伤肿瘤细胞的同时损伤人体的正常组织，个别患者不但未能从化疗受益，反而导致病情进展，生存时间缩短。这使我们意识到化疗的负面影响，引起了对免疫治疗的重视。但是由于目前除个别肿瘤外尚无资料证明单用生物疗法可以治愈晚期癌症，故多作为辅助支持治疗方法。由于缺乏有效的理论指导，免疫治疗在临床上存在着盲目用药。本研究从三个层面综合评价了肺癌患者的免疫状态及化疗对免疫状态的影响，从而为肺癌患者的免疫治疗提供理论依据。材料和方法：(1)应用流氏细胞仪对2002年至2006年4月间189例肺癌患者外周血中的免疫细胞进行检测，运用SAS6.02软件以不齐方差t检验分析外周血T细胞亚群、B淋巴细胞及NK细胞，在不同分期、KPS评分及单灶转移与多灶转移间的差异，并着重以重复测量的实验设计方法分析了102例化学治疗前后肺癌患者免疫状态的变化，以t检验分析了累积化疗周期数＞4周期与≤4周期两组间的差别；并以一般2×2列联表的卡方检验方法分析可预测疗效的免疫指标；(2)应用流式细胞仪检测2005年6月至2006年4月间103例肺癌患者外周血中活性T淋巴细胞：CD3+HLA-DR+、CD4+CD25+、CD8+CD28+细胞的百分数，采用细胞内因子测定法用流式细胞仪检测Th细胞亚群百分数；运用SAS6.02软件以不齐方差t检验分析了以上指标在不同KPS评分、TNM分期及单灶与多灶转移间的差别，并重点用重复测量的实验设计方法分析了83例肺癌患者化疗前后各免疫指标的变化，以不齐方差t检验分析了累积化疗周期数＞4周期与≤4周期两组间的差别；以一般2×2列联表的卡方检验方法分析可预测疗效的免疫指标。(3)采用竞争性定量RT-PCR技术对2005年6月至2006年4月间47例肺癌患者化疗前及化疗1周期结束后抗凝外周血标本进行检测，并以重复测量的实验设计方法分析了化疗前与化疗1周期结束后三种杀伤因子FasL、Granzyme B和Perforin的转录水平，以及累积化疗周期数＞4周期与≤4周期两组间杀伤因子转录水平的差别；采用一般2×2列联表卡方检验法分析三种杀伤分子基因表达水平的变化与疗效的关系，以找出可预测疗效的免疫指标。结果：1，肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群、B细胞和NK细胞水平及化疗对其影响。(1)化疗1周期结束后与化疗前相比较，免疫指标CD3+CD4+细胞百分数，CD4+／CD8+比值较化疗前下降有统计学意义(P≤0.05)，NK细胞及B细胞水平降低无统计学意义。(2)化疗累积周期数＞4周期组与≤4周期组比较，CD3+、CD4+细胞水平、CD4+／CD8+比值均下降，且有统计学意义；CD8+细胞水平上升，有统计学意义。(3)各指标对疗效均无预测作用。(4)不同TNM分期：Ⅳ期组与对照组相比较CD3+、CD3+CD4+、NK细胞百分数及CD4+／CD8+比值下降，均有统计学意义，CD3+CD8+百分比上升且有统计学意义，B淋巴细胞变化无统计学意义。各免疫指标差异于Ⅲ期与Ⅳ期间无统计学意义。(5)KPS评分＜70分组较KPS评分≥70分组，CD4+／CD8+比值和NK细胞水平均下降，且有统计学意义(P≤0.05)。(6)多灶转移组与单灶转移组比较，CD3+CD8+细胞水平升高且有统计学意义(P≤0.05)；CD4+／CD8+比值降低且有统计学意义(P≤0.05)。2，肺癌患者外周血中活性T淋巴细胞的水平及化疗对其影响。(1)化疗1周期结束后与化疗前相比，CD4+CD25+T淋巴细胞比例上升，有统计学意义(P≤0.05)，其它指标差异无统计学意义。(2)化疗累积周期数＞4周期组与≤4周期组比较，CD3+HLA-DR+、CD8+CD28+及Th1细胞水平下降且有统计学意义；CD4+CD25+及Th2细胞水平均上升，有统计学意义。(3)可预测疗效的指标：CD4+CD25+T淋巴细胞上升则疗效差，下降疗效好，其他指标均对疗效无预测作用。(4)不同TNM分期：Ⅲ期组与对照组比较，只有CD3+HLA-DR+细胞水平降低，差异有统计学意义；Ⅳ期组与对照组比较，CD3+HLA-DR+、CD8+CD28+细胞水平下降均有统计学意义，CD4+CD25+与Th2细胞水平上升，且有统计学差异，Th0和Th1细胞水平变化无统计学意义。Ⅳ期组与Ⅲ期组比较，Th1细胞水平下降有统计学意义。(5)KPS评分＜70分组较KPS评分≥70分组，CD4+CD25+细胞及Th2细胞水平上升，而CD8+CD28+细胞水平下降，且皆有统计学意义(P≤0.05)。(6)多灶转移组与单灶转移组比较，免疫指标CD8+CD28+细胞水平下降而CD4+CD25+、Th2细胞水平均上升，变化均有统计学意义(P≤0.05)。3，肺癌患者外周血单个核细胞FasL、Granzym B、Perforin基因表达定量分析及化疗对其影响。(1)化疗1周期结束后与化疗前比较，三种杀伤效应因子FasL、Granzyme B和Perforin基因转录水平均下降，有统计学意义。(2)化疗累积周期数＞4周期组与≤4周期组比较，杀伤效应因子FasL、Granzyme B和Perforin基因转录水平均下降，有统计学意义。(3)Granzyme B、FasL的基因表达水平上升则疗效好，下降疗效差；Perforin对疗效无预测作用。结论：1，化疗对免疫状态的影响：①化疗1周期结束后，CD4+细胞百分数、CD4+／CD8+比值及三种杀伤效应分子FasL、Granzyme B和Perforin基因转录水平呈下降趋势，均有统计学意义。CD4+CD25+T淋巴细胞比例上升，有统计学意义。以上结果提示化疗1周期结束后较化疗前，免疫抑制加重。②化疗累积周期数＞4周期组患者与≤4周期组比较，CD3+、CD4+、CD3+HLA-DR+、CD8+CD28+及Th1细胞水平及CD4+／CD8比值下降，CD8+、CD4+CD25+、Th2细胞水平上升均有统计学意义；三种杀伤效应分子FasL、Granzyme B和Perforin基因转录水平呈下降趋势，均有统计学意义。以上结果提示化疗累积周期数增多，细胞免疫抑制程度加重。③CD4+CD25+T淋巴细胞上升则疗效差，下降则疗效好；而杀伤因子Granzyme B、FasL的基因表达水平上升则疗效好，下降则疗效差，Perforin基因转录水平与疗效无关。2，免疫状态与一般情况的关系：①免疫状态受到TNM分期的影响：Ⅲ期组患者与对照组比较，NK细胞、CD3+HLA-DR+细胞水平及CD4+／CD8+比值下降，且有统计学意义；Ⅳ期组较对照组，除上述两指标外，CD3+、CD3+CD4+、NK、CD3+HLA-DR+、CD8+CD28+细胞水平及CD4+／CD8+比值下降而CD3+CD8+、CD4+CD25+与Th2细胞水平上升均有统计学意义；Ⅳ期组与Ⅲ期组比较，只有Th1细胞水平下降且有统计学意义。以上结果提示Ⅳ期组肺癌患者较Ⅲ期组免疫抑制程度加重。②受到KPS评分的影响：KPS评分＜70分组较KPS评分≥70分组，CD4+／CD8+比值和NK、CD8+CD28+细胞水平下降而CD4+CD25+细胞及Th2细胞水平上升，均有统计学意义。以上结果提示KPS评分低的肺癌患者免疫抑制程度较评分高的患者严重。③多灶转移组与单灶转移组比较，CD8+CD28+细胞水平及CD4+／CD8+比值下降而CD3+CD8+、CD4+CD25+、Th2细胞水平上升，均有统计学意义。以上结果提示多灶转移组较单灶转移组患者免疫抑制程度重。