柠檬酸对小鼠睾丸组织凋亡的影响

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目的:检测了小鼠DNA-ladder、测定了Bax、Bcl-2基因转录水平和蛋白的表达量及Caspase-3活性,研究柠檬酸对小鼠睾丸组织细胞凋亡的影响,并探讨诱导的小鼠睾丸细胞凋亡的机制。方法:昆明系雄性小白鼠40只随机分成4组,每组10只。分别为对照组、柠檬酸低、中、高剂量组。待小鼠适应环境一周后,对各组小鼠进行如下处理:对照组,腹腔注射0.2mL生理盐水;柠檬酸低剂量组、中剂量组、高剂量组分别腹腔注射180mg/kg;270mg/kg;360mg/kg的柠檬酸溶液,注射剂量均为0.2mL。每周1次,连续注射3周,第3次注射后的第7天取小鼠睾丸进行相关检测。结果:(1)通过对细胞DNA-ladder图谱的观察:中剂量和高剂量柠檬酸处理组引起了小鼠睾丸组织细胞的凋亡,而柠檬酸低剂量组未诱导睾丸组织凋亡的产生。(2)柠檬酸能够显著影响Bax的基因转录及蛋白的表达,而对Bcl-2无显著影响。在基因转录水平上,柠檬酸低、中剂量组Bax对照组之间无显著差异(P>0.05),高剂量组与对照组之间有显著差异(P<0.05);与对照组相比,柠檬酸低、中、高剂量组Bax表达量呈上升趋势;柠檬酸低、中、高剂量组Bcl-2与对照组之间无显著差异(P>0.05)。柠檬酸低剂量组Bax/Bcl-2与对照组之间无显著差异(P>0.05),而中、高剂量组Bax/Bcl-2显著差异高于对照组(P<0.05)。在蛋白表达上,柠檬酸低、中、高剂量组Bax蛋白表达量与对照组相比有显著性增加(P<0.05);柠檬酸低、中、高剂量组Bcl-2蛋白表达量与对照组之间无显著差异(P>0.05),与对照组相比,低、中、高剂量组Bcl-2蛋白表达量呈上升趋势;柠檬酸低、中、高剂量组Bax/Bcl-2与对照组相比有显著增加(P<0.05)。(3)柠檬酸中、高剂量组Caspase-3活性显著高于对照组(P﹤0.05),柠檬酸低剂量组与对照组及柠檬酸中剂量与高剂量组间无差异(P﹥0.05)。结论:一定剂量的柠檬酸通过调控Bax的基因转录及蛋白表达增加导致Bax促凋亡与Bcl-2抗凋亡作用失衡,继而激活Caspase-3诱导睾丸细胞凋亡。
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