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目的：观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage colony stimulating factor, GM-CSF)在培养的人角膜上皮细胞(HCECs)中的表达及在烟曲霉菌感染角膜上皮细胞免疫反应中的作用。
方法：烟曲霉菌刺激HCECs不同时间点后，检测GM-CSF的表达水平变化；应用外源性合成的重组人GM-CSF与(HCECs)共培养，检测不同浓度GM-CSF、不同时间刺激下HCECs表达Dectin-1及促炎细胞因子TNF-α、IL-6的变化；外源性GM-CSF与烟曲霉菌共刺激HCECs后，检测dectin-1、TNF-α、IL-6的表达变化；随后加入Dectin-1抑制剂Laminarin处理细胞，检测TNF-α、IL-6表达变化。分别用RT-qPCR、Westernblot及ELISA检测各因子的基因及蛋白表达。
结果：真菌刺激HCECs后，GM-CSF的mRNA表达量较正常对照组升高明显，蛋白表达水平在8h开始逐渐增加。外源性GM-CSF刺激HCECs12h后Dectin-1及炎症因子TNF-α、IL-6mRNA表达量显著升高，且随着GM-CSF浓度提高，其表达量逐渐增加，与正常对照组比较均有统计学意义(P＜0.05)；GM-CSF刺激HCECs24h后Dectin-1蛋白表达水平较正常对照组升高明显，且不同浓度GM-CSF刺激HCECs后TNF-α、IL-6的蛋白表达水平增加，与正常对照组比较有统计学意义(P＜0.05)。GM-CSF与真菌共同作用HCECs，炎症因子TNF-α、IL-6mRNA表达及蛋白表达较真菌组均增加，且Laminarin处理后TNF-α、IL-6mRNA表达及蛋白表达均明显降低。
结论：GM-CSF在真菌刺激的角膜上皮细胞中表达增高；GM-CSF能够促进正常及真菌感染角膜上皮细胞模式识别受体Dectin-1及炎症因子的表达升高，从而参与到调节真菌感染角膜上皮细胞的免疫反应中；Dectin-1在GM-CSF调节真菌感染角膜上皮细胞免疫反应的信号传导通路中发挥作用。
方法：烟曲霉菌刺激HCECs不同时间点后，检测GM-CSF的表达水平变化；应用外源性合成的重组人GM-CSF与(HCECs)共培养，检测不同浓度GM-CSF、不同时间刺激下HCECs表达Dectin-1及促炎细胞因子TNF-α、IL-6的变化；外源性GM-CSF与烟曲霉菌共刺激HCECs后，检测dectin-1、TNF-α、IL-6的表达变化；随后加入Dectin-1抑制剂Laminarin处理细胞，检测TNF-α、IL-6表达变化。分别用RT-qPCR、Westernblot及ELISA检测各因子的基因及蛋白表达。
结果：真菌刺激HCECs后，GM-CSF的mRNA表达量较正常对照组升高明显，蛋白表达水平在8h开始逐渐增加。外源性GM-CSF刺激HCECs12h后Dectin-1及炎症因子TNF-α、IL-6mRNA表达量显著升高，且随着GM-CSF浓度提高，其表达量逐渐增加，与正常对照组比较均有统计学意义(P＜0.05)；GM-CSF刺激HCECs24h后Dectin-1蛋白表达水平较正常对照组升高明显，且不同浓度GM-CSF刺激HCECs后TNF-α、IL-6的蛋白表达水平增加，与正常对照组比较有统计学意义(P＜0.05)。GM-CSF与真菌共同作用HCECs，炎症因子TNF-α、IL-6mRNA表达及蛋白表达较真菌组均增加，且Laminarin处理后TNF-α、IL-6mRNA表达及蛋白表达均明显降低。
结论：GM-CSF在真菌刺激的角膜上皮细胞中表达增高；GM-CSF能够促进正常及真菌感染角膜上皮细胞模式识别受体Dectin-1及炎症因子的表达升高，从而参与到调节真菌感染角膜上皮细胞的免疫反应中；Dectin-1在GM-CSF调节真菌感染角膜上皮细胞免疫反应的信号传导通路中发挥作用。