论文部分内容阅读
目的:1.研究槲皮素对ERα(+)的人乳腺癌MCF-7细胞,ERα(-)人乳腺癌MDA-MB-231细胞,人鼻咽癌5-8F细胞和人肝癌Hep-G2细胞增殖的影响,并比较其差异。2.研究槲皮素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。 方法:1.采用不同浓度组槲皮素(Hep-G2细胞和5-8F细胞,1.25、2.5、5、10、20μM;MDA-MB-231细胞,1.25、2.5、5、10、20、50μM;MCF-7细胞,1.25、2.5、5、10、20、50、100、200μM)作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞、人乳腺癌MDA-MB-231细胞、人肝癌Hep-G2细胞、人鼻咽癌5-8F细胞,48h后MTT法测定槲皮素对四种肿瘤细胞增殖的影响。2.采用不同浓度组(1.25、2.5、5、10、20、50、100、200μM)槲皮素作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,MTT法在不同时间收取细胞(24h和48h)测定槲皮素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,另外使用DAPI染色法观察细胞核形态学改变,FCM法测定其细胞周期变化,AnnexinⅤ/PI双染法检测其细胞凋亡情况。 结果:1.槲皮素能够明显的抑制四种肿瘤细胞,其抑制增殖作用从低到高分别为人乳腺癌MCF-7细胞IC50=36.7μM、人乳腺癌MDA-MB-231细胞IC50=18.5μM、人鼻咽癌5-8F细胞IC50=7.9μM、人肝癌Hep-G2细胞IC50=6.1μM。其中槲皮素低浓度组(1.25μM组)轻度促进ERα(+)的人乳腺癌MCF-7细胞增殖,而对另外三种细胞无此效应。2.槲皮素能够明显的抑制人乳腺癌MCF-7细胞生长,且48h的抑制效果大于24h的抑制效果。荧光显微镜下观察,槲皮素20μM组细胞出现S期阻滞细胞形态,槲皮素50μM组S期阻滞细胞减少,部分细胞出现凋亡形态学特征。槲皮素处理后,MCF-7细胞G1期细胞比例下降,S期细胞比例升高,当浓度≥50μM出现G1期细胞比例回升,而S期比例有所下降。在AnnexinⅤ/PI双染法检测其细胞凋亡结果中,随着槲皮素浓度升高活细胞比例下降,浓度≥20μM出现显著凋亡。这提示,低浓度组槲皮素使人乳腺癌MCF-7细胞发生S期阻滞,高浓度组槲皮素(≥50μM)则促进其发生细胞凋亡。 结论:1.槲皮素对四种肿瘤细胞有不同程度的抑制作用;低剂量槲皮素组对MCF-7有弱促增殖效应,可能与MCF-7ERα(+)的遗传背景有关。2.槲皮素能抑制人乳腺癌MCF-7细胞生长,且存在两种机制:低浓度组以细胞S期阻滞为主,高浓度组以促进细胞凋亡为主。