论文部分内容阅读
目的:研究和探讨在大鼠视觉发育敏感期内神经生长因子(NGF)对单眼剥夺大鼠视觉中枢神经型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元数量及形态的影响,为临床预防和治疗弱视拓展思路并提供基础研究依据。方法1. 14 日龄健康雄性SD 大鼠64 只,随机分成8 组。于生后14 日在乙醚吸入麻醉下进行左侧眼睑缝合,制成单眼剥夺模型。其中正常组1(N1)6 只, 单纯单眼剥夺组1(MD1)6 只, 单眼剥夺侧脑室插管注射神经生长因子组1(MD+NGF)1 10 只, 单眼剥夺侧脑室插管注射生理盐水组1(MD+NS)1 10 只, (MD+NGF)1 组与(MD+NS)1 组于14 日龄进行右侧侧脑室插管,四组均于28 日龄处死。正常组2(N2)6 只, 单纯单眼剥夺组2 (MD2)6 只, 单眼剥夺侧脑室插管注射神经生长因子组2 (MD+NGF)2 10 只, 单眼剥夺侧脑室插管注射生理盐水组2 (MD+NS)2 10 只, (MD+NGF)2 组与(MD+NS)2 组于28 日龄进行右侧侧脑室插管,四组均于42日龄处死。插管动物均于插管即日起分别给予生理盐水、神经生长因子注射。并于两周后处死,灌注固定。2.采用免疫组织化学SABC技术染色和计算机图象分析处理系统,观察视觉发育敏感期内不同日龄(28 日龄和42日龄)正常大鼠[N1、N2]、单纯单眼剥夺大鼠[MD1 、MD2]、单眼剥夺并侧脑室插管注射神经生长因子大鼠[(MD+NGF)1、(MD+NGF)2]、单眼剥夺并侧脑室插管注射生理盐水大鼠[(MD+NS)1、(MD+NS)2]nNOS 阳性神经元在外侧膝状体背核(dLNG)、视皮质17 区数量与形态的变化。3.应用SPSS 12.0 版软件包对结果进行统计学分析处理。结果1.光镜观察结果参照17 区皮层尼氏染色结果观察,28 日龄N1 组和(MD+NGF)1 组nNOS 阳性神经元在大脑皮质枕叶17 区Ⅱ~Ⅵ层均有散在分布,其中以Ⅱ/Ⅲ层和Ⅴ/Ⅵ层为多;在形态上,属于中间神经元,大多为非锥体神经元,也有少量锥体神经元。多呈圆形、卵圆形、梭形和三角形,胞体较大,突起明显,有的突起延伸很长且反复分支,免疫组化反应使胞质和突起呈棕褐色,胞核不着色,核仁清晰可见。MD1组和(MD+NS)1 组nNOS 阳性神经元在大脑皮质枕叶17区在分布与形态上和正常组相似,但染色淡,胞体小,树突长度较短,且密度降低。42 日龄各组nNOS 阳性神经元在大脑皮质枕叶17 区分布及形态与28 日龄处死组相似,但胞体较小,树突分支减少。胞体和突起染色较淡,呈棕色,核仁清晰。N2 组神经元胞体面积较MD2、(MD+NGF)2、(MD+NS)2 三组大;但数密度和树突长度上比较差别不明显。28 日龄N1 组和(MD+NGF)1 组nNOS 阳性神经元在