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兰州百合(Lilium davidii unicoior Cotton)主要采用茎生子球、鳞片扦插等无性繁殖方式进行繁殖。在此过程中病毒病很容易传播和蔓延,影响兰州百合的产量和品质。以组织培养为基础的脱毒快繁技术,不仅能脱除病毒,还能够大幅度地提高兰州百合籽球的质量和繁殖系数,是提高产量和质量的有效途径。本试验以兰州百合为试材,通过田间调查、病毒粒体形态电镜观察和酶联免疫吸附反应双抗加心法诊断,对主要危害兰州百合的病毒流行优势种类进行了鉴定;用7种脱毒方法(茎尖培养、花丝培养、花瓣培养、种子培养、鳞片培养以及热处理结合茎尖培养、花丝培养)对兰州百合进行了脱毒试验;同时对兰州百合脱毒试管苗的移栽环境、炼苗方法、移栽基质选择、移栽时期、移栽后的管理条件等种球培育关键技术进行了较系统研究。取得如下结果:1.目前主要危害兰州百合的病毒流行优势种类为CMV、LSV、TBV,且普遍呈复合侵染和隐性侵染。2.茎尖培养结合热处理能提高脱毒效果,脱毒率达70%;花丝培养结合热处理,切取0.8～1.0mm茎尖培养的脱毒效果最好,脱毒率达80%以上,该方法操作简便、快速高效,可在百合生产上推广应用。3.用花丝做外殖体,灭菌时间控制在15～20分钟,污染率低;从长势、苗色、直接分化植株数等综合因子考虑,适宜花丝诱导的培养基为MS+BA1mg/L+IBA0.5 mg/L;适宜继代增殖培养基为MS+BA1.5mg/L+NAA0.2～0.5mg/L,在此培养基下,长势良好;生根培养基以B5+IAA0.2mg/L最佳,在此培养基下,生根率最高,为90.5%,且根系发达。4.总结出一套较为完善的兰州百合脱毒原种籽球培育技术:5月上旬前后,将生根百合试管苗在较强光照(1.6×10~4lux～2.4×10~4lux)下闭瓶炼苗14d左右,开瓶炼苗2～3d,在防虫网室内采用全光迷雾技术保湿、降温,用经过消毒处理的草炭作移栽基质,利用“过渡层”移栽原种苗,繁育兰州百合原种种球。利用该项技术,可以简化移栽程序、缩短原种培育周期、降低种球培育成本。