背景:肝豆状核变性(Hepatolenticular Degeneration,HLD),又称Wilson病(Wilson’s Disease,WD),是一种ATP7B基因突变致病的常染色体隐性遗传疾病,临床主要表现为全身性铜异常沉积引起的肝脏、大脑基底节乃至肾脏、心脏、骨骼等各系统的功能和器质性损伤。WD基因具有高度的遗传特异性,虽然突变位点众多,但以少数几个热点突变为主,且大多为复合杂合突变,不同国家和地区的基因突变高频位点有所差异。研究指出:目前尚未发现WD携带者存在神经系统症状,但可能存在部分铜代谢异常,包括给予驱铜药物后尿铜增高及脑脊液铜稍高于正常健康人群等。推测可能由于WD携带者存在ATP7B杂合突变,导致铜代谢过程轻度异常,从而引起体内铜轻度积累,即WD携带者有亚临床铜潴留的发生,但尚未到达出现临床症状的水平。目前已有许多学者在进行WD基因型---表型方面的研究,而WD携带者的基因型与临床实验室指标之间的关系尚未有相关研究及报道,需进一步研究。目的:通过对WD患者、WD携带者(明确诊断为WD患者的父母)及健康对照组行ATP7B基因21个外显子直接测序,并进行肝功能、肝纤维化及铜生化指标检测,分析WD携带者及患者ATP7B基因突变的特征和差异并分析其与临床生化指标之间的相关性和相异性,探讨ATP7B基因突变检查对WD携带者与患者的鉴别诊断及WD发病机制的意义,进一步研究携带者和患者的基因型、携带基因频率与临床表型相关性。方法:以2013年~2015年在我院住院确诊的WD患者的父亲或(和)母亲为实验组,WD患者及普通健康人分别为对照组,留取外周血样本,并记录其姓名、性别、年龄、病程、首发症状等临床资料,留取并检测入组者肝功能、铜生化、肝纤维化指标,收集并提取基因标本,应用DNA测序方法对上述三组进行ATP7B基因突变检测,并统计基因突变情况,采用统计软件分析高频突变位点与年龄、性别及生化指标等临床表型的相关性。结果:1.剔除271例携带者组入组检测后属复合杂合及纯合突变的23例,余248例中未检测出致病突变位点共68例,检测出杂合突变22种共178例(其中4例检测出意义不明确突变点),染色体突变频率为35.89%;高频突变外显子为8号、13号、11号外显子,高频突变位点为2333G>T、2975C>T及2621C>T突变,突变频率分别是16.73%、7.46%、2.62%。2.240例WD患者对照组检测出致病突变共36种,其中10例检测出意义不明确的突变位点,12例未检测出致病突变,90例仅检测出一个位点杂合突变,高频突变外显子为8号、13号、11号、16号外显子。3.132例健康对照组检测出杂合突变共4例。4.WD携带者组中检测出突变位点与未检测出突变位点者在性别上无明显差异性;WD携带者组中检测出两个突变位点与非两个突变位点者在性别上无明显差异性;WD携带者组中检测出2333G>T突变位点与非2333G>T突变位点者在性别上无明显差异性;WD携带者组中检测出2975C>T突变位点与非2975C>T突变位点者在性别上无明显差异性;WD携带者组中检测出2333G>T突变位点与2975C>T突变位点者在性别上无明显差异性。5.WD携带者组中检测出2333G>T突变、C2975T突变与未检测出突变位点者肝功能各项指标、铜生化各项指标、肝纤维化各项指标两两比较时均无显著差异性。6.WD携带者组中未检测出突变位点、检测出一个突变位点与检测出两个及以上突变位点者铜蓝蛋白指标两两比较均无显著差异性。7.总胆汁酸在WD患者组、携带者组与健康人组之间两两比较均有显著差异性;总胆红素、直接胆红素、白蛋白在WD患者组与WD携带者组之间无显著差异性,而在健康人组与WD患者组及WD携带者组之间均有显著差异性;谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白在WD携带者组与健康人组之间无显著差异性,而在WD患者组与携带者组及健康人组之间均有显著差异性。8.血清铜、铜蓝蛋白在WD患者组、携带者组与健康人组之间两两比较均有显著差异性,铜氧化酶在携带者组与健康人组之间无显著差异性,而在WD患者组与携带者组及健康人组之间有均显著差异性。9.层粘连蛋白、Ⅳ型胶原在WD患者组、携带者组与健康人组之间两两比较均有显著差异性,透明质酸在WD患者组与携带者组之间无显著差异性,而在健康人组与WD患者组及携带者组之间有显著差异性。结论:WD患者组与WD携带者组主要基因突变位点都位于8号、13号、11号外显子上;WD携带者与WD患者,WD携带者与健康人之间肝功能、铜生化、肝纤维化指标存在显著差异性,此生化指标可考虑作为WD携带者诊断、与患者及正常人鉴别诊断辅助标准;携带高频突变基因的WD携带者的临床表型无显著差异性。