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中国林蛙(Rana chensinensis),又称雪蛤或哈什蟆,主要生长在中国东北的长白山、松花江和鸭绿江上游森林地区,是传统的食、药两用珍贵滋补保健品,具有广泛的药理活性和多种保健功能,存在巨大的开发价值和经济价值。林蛙最珍贵的部分是其雌性的输卵管,即林蛙油(Oviductus Ranae)。大量的研究证实了林蛙油中富含糖蛋白、必需氨基酸、多糖、酶等生物活性物质,具有抗氧化、抗衰老、提高免疫力等多种保健功能。为了探索林蛙油中的有效活性成分,及其单一物质的功能性,并为开发天然、绿色、安全的保健食品提供理论支撑,本论文以长白山林蛙输卵管为研究对象,分离纯化得到一种糖蛋白,并研究了该糖蛋白的抗疲劳功能活性,主要研究结果如下:1、林蛙输卵管总蛋白的提取及单一蛋白分离纯化采用反复冻融法提取林蛙输卵管总蛋白,通过单因素试验和正交试验确定了最优工艺条件是料液比1:4,4℃下振荡浸泡时间12h,在-80℃中冻融3次。使用的PBS缓冲液浓度为0.05M,pH为7.4,总蛋白提取得率为7.1mg/g。2、林蛙输卵管糖蛋白的分离纯化及其基本结构鉴定结合蛋白分离的基本法则和林蛙输卵管组织的特异性,使用50%饱和度硫酸铵盐析,透析袋透析,经过DEAE-Sepharose层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析,分离纯化得到一种糖蛋白。经SDS-PAGE电泳鉴定,分子量为50kDa左右。经高效液相色谱鉴定,纯度为93.7%,PAS染色证明其为糖蛋白,分离纯化过程中该糖蛋白完整性良好,结构没有破坏,将其命名为ROGP-Ⅱ。3、林蛙输卵管糖蛋白的抗疲劳功能活性试验ROGP-Ⅱ可显著延长小鼠的游泳时间,能使小鼠肝糖原的储备量增加,血乳酸生成量减少,并能抑制小鼠血清尿素氮升高,这证明ROGP-Ⅱ能够使机体对运动负荷的适应能力增强并且能延缓疲劳的产生,但是小鼠体内乳酸的堆积量并没有明显地减少,说明ROGP-Ⅱ在消除疲劳方面的作用并不显著,因此ROGP-Ⅱ具有一定的抗疲劳作用。