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鸡对光照变化十分敏感。鸡的很多生理机能,如生长发育、行为活动和免疫功能都受到光照环境的影响。HPA轴参与调控动物的行为以及能量代谢,由它调控所分泌的糖皮质激素也呈现一定的节律性。除了 HPA轴,脑内胆固醇含量与动物的行为也具有着密切的联系。胆固醇是动物早期发育阶段以及成年期构成神经元的基本成分,脑内胆固醇的缺失往往与一些退行性神经疾病有着密切的关系。在本论文中我们首先探究了不同光照时间对鸡行为模式及脑内胆固醇代谢的影响。随后我们设计实验在雏鸡出生后第一周采用两种不同的光照时间,目的在于探究生长关键期不同的光照时间是否会对后面的行为及脑内胆固醇代谢产生影响。1.生长期光照时间对如皋黄鸡生长、行为及脑内基因表达的影响将1日龄如皋黄鸡分成两组,分别在24L:0D(LL组)和12L:12D(LD组)光照程序下饲养。在7日龄进行行为学测试,饲养至21日龄试验结束,断头采血,采集脑组织。结果表明:与LL组相比较,LD组如皋黄鸡体重显著降低(P<0.01),但是肉料比(G/F)显著提高(P<0.01);LD组血浆中肌酸激酶水平(CK)和总胆固醇水平(T-chol)显著降低(P<0.01);LD组血浆中褪黑激素的含量显著升高(P<0.01);LD组如皋黄鸡表现出更好的运动能力,紧张不动性(TI)的时间显著降低,抑郁样行为表现减少。我们检测了脑中相关功能基因表达,结果显示:与LL组相比,LD组海马中糖皮质激素GR以及20HSD的mRNA水平显著下降(P<0.01);11β-HSD1的mRNA水平显著升高(P<0.05);五羟色胺代谢相关的基因没有发生显著性变化;钟基因BMAL1、CRY1和PER2的mRNA水平显著升高(P<0.01)。LD组下丘脑中11β-HSD1和11β-HSD2的mRNA水平显著升高(P<0.05),五羟色胺代谢相关基因5-HTRIA的mRNA水平显著降低(P<0.05),NPY、AGRP以及钟基因CLOCK、BMAL1、CRY1和PER2的mRNA水平均显著升高(P<0.05)。亚硫酸盐测序(BSP)结果表明:不同的光照时间使得GR的启动子区甲基化率发生了明显的变化。以上结果提示:与长时间光照相比,短时间光照下如皋黄鸡抑郁样行为表现较少、TI时间较短并且运动能力较强。尽管长时间光照促进了如皋黄鸡体重增加,但是短光照下如皋黄鸡具有更高的肉料比。光照时间的不同还改变了 GR启动子区甲基化率。2.出雏后早期光照时间对罗斯308肉鸡生长、行为及脑内基因表达的影响将1日龄罗斯308肉鸡随机分成两组,第一周采用两种不同光照时间(LL组和LD组),第二周开始全部采用LD光照制度,在7日龄进行行为学测试。第16日龄试验结束,断头采血,采集脑组织。结果表明:与LL组相比,LD组肉鸡体重以及料肉比(G/F)无显著差异;LD组罗斯308肉鸡血浆中肌酸激酶(CK)水平、总胆固醇(T-chol)、甘油三酯(TG)以及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、天冬氨酸转氨酶(AST)以及丙氨酸转氨酶(ALT)的水平(P<0.01)显著降低;LD组肉鸡具有更好的运动能力,TI时间也显著低于LL组(P<0.01)。脑内相关功能基因表达结果显示:LD组海马中1 1β-HSD2、五羟色胺合成的关键酶TPH1以及钟基因PER2的mRNA表达量显著提高(P<0.05);GR、MR和11β-HSD1的mRNA表达没有显著变化。下丘脑中LD组11β-HSD1、20HSD、TPH1、摄食因子NPY以及钟基因CRY1、CRY2、PER2、PER3的mRNA表达量显著性升高(P<0.05);GR、5-HTR1A和MAO-A的mRNA表达量显著降低(P<0.05)。GR的蛋白表达显著降低(P<0.05)。以上结果提示:出雏后早期不同光照时间会影响罗斯308肉鸡的行为,并且在LD的光照模式下肉鸡表现出较好的行为模式。出雏后早期不同光照时间有可能会导致生长后期脑内基因表达的改变。3.出雏后早期光照时间对罗斯308肉鸡下丘脑以及肝脏胆固醇的影响将1日龄罗斯308肉鸡随机分成两组,第一周采用两种不同光照时间(LL组和LD组),第二周开始全部采用LD光照制度。第16日龄试验结束,断头采血,采集脑以及肝脏组织。检测下丘脑中胆固醇的含量并利用real-time PCR技术检测脑以及肝脏内胆固醇合成以及分解的关键基因。提取脑内蛋白采用Western blot检测脑以及肝脏内胆固醇代谢途径中关键蛋白的表达情况。结果显示:与LL组相比,LD组罗斯308肉鸡下丘脑内胆固醇的含量都显著升高(P<0.05),下丘脑中基因SREBP1、SREBP2、HMGCR、LDLR以及CYP46A1都显著性升高(P<0.05);蛋白检测结果显示:LD组罗斯308肉鸡下丘脑内SREBP1、SREBP2、HMGCR以及LDLR的蛋白水平都显著升高(P<0.05)。同时,CYP46A1和CYP11A1也都显著升高(P<0.05)。我们检测了罗斯308肉鸡肝脏内胆固醇的含量发现LD组肝脏内胆固醇显著低于LL组(P<0.05)。与LL组相比,LD组肝脏内胆固醇合成相关的基因SREBP1以及HMGCR显著降低(P<0.05),促进胆固醇分解的基因CYP27A1显著升高(P<0.05)。以上结果表明:LD的光照制度显著性的提高了仔鸡发育早期下丘脑内胆固醇的含量同时降低了肝脏内胆固醇的含量。我们推测LD的光照制度可能更有利于脑内神经元的发育从而雏鸡具有良好的行为表现而肝脏内低胆固醇含量有利于防止脂肪肝的发生。