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结核病依然对人类健康具有极大威胁的传染性疾病之一，结核分枝杆菌（以下简称结核菌）是结核病的病因，结核菌能在巨噬细胞内长期存活是其引起结核病的主要因素之一。研究证实，存活于巨噬细胞内的结核菌能大量表达一种小分子热休克蛋白Hsp16.3。Hsp16.3的大量表达引起结核菌细胞壁的明显增厚。因此，推测Hsp16.3的表达有利于结核菌在巨噬细胞内的存活。 Hsp16.3在天然状态下是由三个三聚体组成的九聚体形式，Hsp16.3在体外最主要的功能就是其具有分子伴侣活性（molecular chaperone activity）。我们通过定点诱变其α-crystallin domain中的保守区域LPGV中的甘氨酸（Glycine G）为色氨酸（Tryptophan W），并结合Chaperone活性的检测、ANS荧光探测、CD光谱技术、非变性孔径梯度凝胶、FPLC以及内源荧光检测技术提出Hsp16.3九聚体的解聚是其发挥分子伴侣活性的前提，三聚体可能是其发挥分子伴侣活性的基本单位；同时，我们还认为，Hsp16.3的LPGV区位于其三聚体与三聚体的作用面。 通过将Hsp16.3与38kDa蛋白融合后利用IPTG梯度诱导表达时发现，在IPTG0.8mM时，融合蛋白主要以可溶性形式存在，而38kDa单独表达依然是包涵体的形式存在。由此我们推测，Hsp16.3可能还具有分子内伴侣活性（intramolecular chaperone activity）。 尽管Hsp16.3中有三个甲硫氨酸（Methionine）在体外能被过氧化氢（H2O2）逐一氧化，我们将Hsp16.3基因克隆到pMV261质粒上，并转染到耻垢分枝杆菌中发现，转染了pMV261-16.3的耻垢分枝杆菌抗过氧化氢的能力大大下降，而对照含pMV261-38kDa的耻垢分枝杆菌抗过氧化氢的能力却有明显的增强，据此，我们认为，Hsp16.3在细胞内可能不具有抗过氧化氢的能力。 Hsp16.3在细胞内的功能如何?至今仍然没有得到明确回答。我们虽然通过免疫共沉淀的方法没有抓取到Hsp16.3在细胞内的底物，但由于Hsp16.3在体外明确了其分子伴侣活性的存在，同时，我们从大肠杆菌中纯化得到的Hsp16.3蛋白在经过免疫印迹实验时发现总是伴随着一个30kDa大小的蛋白的存在，因此，我们坚信，Hsp16.3在细胞内一定存在其相应的底物。 此外，我们利用pKO质粒敲除（knock out）了卡介苗菌（BCG）中的MDP1基因，但并没有观察到敲除菌株的生长速度明显加快，说明MDPI基因在细胞内并不是决定细胞生长速度的唯一因素。不过，我们建立了分枝杆菌中基因敲除的技术平乙入