背景:肝癌是我国常见恶性肿瘤之一,严峻的形势给我国社会和医疗带来沉重负担,患者承受巨大的心理压力与经济压力。因此,寻找肝癌特有的肿瘤标志物,从而开展早期治疗,提高患者的生存率至关重要。本课题已探究Dok2和RASA1在肿瘤中的相关作用,并且明确此基因是肿瘤抑制基因。中药在肿瘤治疗中发挥重要作用,在国内外也有中药治疗肿瘤的相关研究。川芎嗪药物主要化学成分为四甲基吡嗪（Tetramethylpyrazine,TMP）。中药川芎嗪在中国被认为是一种抗癌中药而广泛使用。有研究表明川芎嗪对卵巢癌、乳腺癌、骨肉瘤、胃癌、肝癌和肺癌等有明显的抑制作用。研究实验数据证实川芎嗪对肝癌细胞增殖以及侵袭转移有明显的抑制作用,并且调控了RASA1和Dok2的表达。通过探讨RASA1-Dok2抗肝癌的分子机制以及川芎嗪对此信号通路的调节过程,从而为临床提供肝癌早期治疗和预后相关重要依据。目的:本研究拟探讨Dok2/RASA1与肝癌发生的分子机制。探讨Dok2和RASA1蛋白在肝癌预后中发挥的作用。本课题进一步证实川芎嗪抗肝癌分子机制,在肝癌治疗和预后里具有重要意义。方法:通过筛选临床中165名接受手术治疗患者,组织病理学诊断为HCC。通过免疫组织化学检查Dok2和RASA1蛋白。使用Kaplan-Meier分析肝癌患者生存预后数据,以此来探讨Dok2/RASA1表达与生存期之间的关系。通过单因素或者多因素分析,研究临床患者病理参数的潜在预后重要性,并且通过加入不同浓度的川芎嗪药物处理Hep G2细胞,进行MTT实验和细胞损伤修复实验,分别观察其增殖和迁移能力。通过Western blotting实验检测Dok2和RASA1的表达。结果:1.Dok2/RASA1在低分化HCC样本中呈弱表达。Dok2和RASA1的阴性表达与肿瘤体积较大、腋窝淋巴结转移比例较高和临床分期较晚有关。Dok2和RASA1的阳性表达,与肿瘤体积小、腋窝淋巴转移低、临床分期较早有关。2.Dok2和RASA1表达均与HCC患者的无病生存（DFS）、肿瘤体积大小、高比例的腋窝淋巴结转移和较差的TNM分期或临床分期相关。Cox回归分析显示Dok2和RASA1表达、腋窝淋巴结转移比例高、TNM分期或临床分期差是HCC复发的显着独立预测因子。3.通过对于这165例肝癌患者单因素Kaplan-Meier分析,结果显示Dok2阴性表达的肝癌患者OS显著低于Dok2阳性表达患者。RASA1基因阴性表达的肿瘤患者,OS显著低于RASA1阳性患者。而Dok2与RASA1共同阴性表达的肝癌患者总体生存率低,预后明显不良。这些结果表明RASA1/Dok2的下调表达与较差的生存期之间存在相关性。4.川芎嗪（Tetramethylpyrazine,TMP）以剂量依赖性方式抑制Hep G2细胞增殖,200μm TMP是最佳剂量,对于肝癌细胞抑制最明显,这与细胞划痕试验中的发现一致。研究数据显示TMP上调了Dok2和RASA1的表达。结论:Dok2和RASA1的联合下调与HCC的癌症进展、复发和较差的生存结果有关。通过靶向肝癌细胞的生物标志物Dok2/RASA1,发现川芎嗪药物是治疗肝癌细胞一种很好的选择。免疫组化结果显示,Dok2/RASA1的弱表达与低分化腺癌HCC样本的发生有关。Dok2/RASA1呈阴性,肿瘤体积大,淋巴结转移高,TNM或BCLC分期较晚。此外,Dok2的阴性表达与RASA1的阴性表达有关,表明RASA1调节Dok2基因表达,但需要进一步的细胞和分子研究来证实。研究表明,Dok2和RASA1是肝癌抑制因子,可以抑制肿瘤细胞增殖,Dok2和RASA1的联合检测可以提高HCC的诊断敏感性。