论文部分内容阅读
目的:通过黑沙蒿乙酸乙酯、正丁醇萃取物化学成分的系统全面研究,并结合课题组其他成员黑沙蒿石油醚和二氯甲烷萃取物化学成分研究结果,摸清黑沙蒿的整体化学信息。再经黑沙蒿整体化学信息及其治疗风湿性关节炎的网络药理学研究,探讨黑沙蒿治疗风湿性关节炎作用机制及活性部位。方法:采用常规硅胶、Sephaddex LH-20等柱色谱法、TLC及高效液相色谱法对黑沙蒿乙酸乙酯及正丁醇萃取物进行分离精制,得到单一化合物。经单一化合物各种波谱数据的测定与分析,确定其化合物结构式。同时,通过整理归纳课题组其他成员黑沙蒿石油醚和二氯甲烷萃取物化学成分研究结果及文献报告化学信息,并采用Chem draw 14.0软件绘画它们结构式,转化为标准的Canonica1 SMILES格式保存。把SMILES格式导入Swiss Target Prediction数据预测黑沙蒿化学成分作用靶点,通过DisGeNET和OMIM数据库中检索风湿性关节炎相关靶点,取两者靶点交集,利用STRING数据库构建PPI网络。通过DAVID进行GO功能富集和KEGG通路富集分析,再利用Cytoscape 3.7.2软件构建化合物-靶点-通路网络图。结果:从黑沙蒿乙酸乙酯和正丁醇萃取物中分离鉴定了 15个化合物,分别为 IntegrinA(1)、Integrin B(2)、OrdosacidA(3)、Ordosacid B(4)、Ordosicin A(5)、Ordosicin B(6)、cinnamic acid(7)、ferulic acide(8)、caffeic acid(9)、4,4’-dihydroxy-3,3’-dimethoxy-7-O-7’-epoxylignan(10)、4,4’,7,7’-tetrahydrox y-3,3’-dimethoxy-8-8’-lignan(11)、4,4’,7,7’-tetrahydroxy-3,3’-dimethoxy-7-O-7’-epo xylignan(12)、Cymbadahoside A(13)、Artemordolignan glycoside A(14)和PhysochlosideA(15)。经黑沙蒿整体化学信息分析可知,其作用靶点剔除重复项后得到600个基因靶点,55个靶点与风湿性关节炎相关。通过GO功能富集和KEGG通路富集分析收集到281条BP条目、20条CC条目、36条MF条目,35条KEGG信号通路。按Degree值和BC值大小排序发现MAPK1、PIK3CG、PIK3CD、MMP9、MMP2 等靶点为核心靶点,Ordosicin B、Integrin A、caffeic acid、ferulic acide、5-hydroxy-7,4’-dimethoxyflavone 等为核心成分,预测二氯甲烷及乙酸乙酯萃取物为活性部位。结论:从黑沙蒿乙酸乙酯萃取物中分离鉴定了 12个化合物(编号1-12),而正丁醇萃取物3个化合物(编号13-15,其中,化合物1、2、3、4、5、6、14、15为未见文献报道的新化合物,其它化合物均为首次从该植物中分离得到。本研究体现了蒙药黑沙蒿治疗风湿性关节炎作用,且多成分-多靶点-多途径的作用特点,该研究还为黑沙蒿治疗风湿性关节炎的作用机制提供了新的思路,为后续机制验证实验指明了方向。