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本研究分为如下三部分:
第一部分:早期老年性痴呆患者外周淋巴细胞PP-2A的变化
目的:通过检测外周血淋巴细胞蛋白磷酸酯酶2A(proteinphosphatase-2A,PP-2A)的活性及表达的改变,探讨PP-2A的变化对早期阿尔茨海默病可能存在的潜在的意义。
方法:采集健康老年志愿者(11例)、轻度认知功能障碍(mildcognitionimpairment,MCI)组(11例)及阿尔茨海默病组(Alzheimer’sdisease,AD)(11例)外周静脉抗凝血,淋巴细胞分离液(Lympholyte-H)离心分离淋巴细胞。放射性配体结合实验检测MCⅠ组、AD组及正常老年人组外周淋巴细胞PP-2A的活性,Western-blotting检测PP-2A的表达。
结果:1.MCI的外周淋巴细胞PP-2A活性(0.71±0.12),与对照组(1.01±0.09)相比明显降低(p<0.01),AD组PP-2A活性(0.64±0.11)与对照组比较也明显降低(p0.01)。2.MCI患者PP-2A的表达明显降低(0.8±0.05),与对照组(0.96±0.07)比较有显著性差别(p<0.01),AD患者的PP-2A的表达也明显降低(0.76±0.06),与对照组(0.96±0.07)比较有显著性差别(p<0.01)。
结论:MCI及AD患者外周淋巴细胞PP-2A的活性及表达降低,在早期AD的诊断中可能有临床参考价值。
第二部分:老年性痴呆患者脑脊液中PP-2A的变化
目的:通过检测正常老年人以及AD患者脑脊液蛋白磷酸酯酶2A(proteinphosphatase-2A,PP-2A)的活性及表达的改变,探讨脑脊液中PP-2A的异常变化对阿尔茨海默病诊断可能的价值。
方法:1.采集健康老年志愿者(7例),老年性痴呆组(Alzheimersdisease,AD)(5例)脑脊液。2.放射性配体结合实验检测AD组,及正常老年人组脑脊液PP-2A的活性。Western-blotting检测了PP-2A的表达。
结果:1.AD患者PP-2A的表达升高(1.10±0.09),与对照组(0.98±0.06)相比较有明显的差别(p<0.05)。2.AD组PP-2A活性(0.91±0.07)与对照组(1.01±0.06)比较也明显降低(p<0.05)。
结论:AD患者脑脊液中PP-2A的表达升高,其活性降低,PP-2A的表达升高可能是对酶活性降低的代偿。
第三部分:早期老年性痴呆患者血浆PP-2A的变化
目的:通过检测正常老年人、MCI患者、AD患者血浆蛋白磷酸酯酶2A(proteinphosphatase-2A,PP-2A)的活性及表达的改变,旨在探讨血浆PP-2A的异常变化在阿尔茨海默病诊断可能的价值。
方法:1.采集健康老年志愿者(11例),轻度认知功能障碍(mildcognitionimpairment,MCI)组(11例),老年性痴呆组(Adzheimer’sdisease,AD)(11例)外周抗凝静脉血,离心:4℃、3000g离心10分钟,分离血浆。2.放射性配体结合实验检测MCⅠ组,AD组,及正常老年人组血浆PP-2A的活性。Western-blotting分别检测了各组PP-2A的表达。
结果:1.MCI的血浆PP-2A活性(0.98±0.08),与对照组(1.01±0.08)相比无明显降低(p>0.05),与AD组(0.87±0.08)比较有明显差别(p<0.05)。2.MCI患者PP-2A的表达明显降低(0.78±0.06),与对照组(0.99±0.07)比较有显著性差别(p<0.01),AD患者的PP-2A的表达也明显降低(0.88±0.07),与对照组)比较有显著性差别(p<0.05),与MCⅠ组比较也降低(p<0.05)。
结论:AD患者血浆中PP-2A的表达降低,其活性也降低,MCI患者PP-2A的表达降低,其活性无明显升高,此结果提示:血浆中PP-2A的表达降低及活性异常降低,可能会对早期AD的诊断有帮助。