目的:随着工业化、城市化进程的加快,我国已成为世界大气污染最严重的国家之一。大气污染中的柴油机尾气颗粒物(diesel exhaust particles DEP)含有的多环芳烃、二噁英、硝基酚有内分泌干扰物活性,可影响雌激素受体的表达,有雌激素、抗雌激素和抗雄激素活性。动物试验证明DEP有明显的生殖毒性。黄芪注射液主要成分为氨基酸、黄酮类、多糖及微量元素等,可拮抗氯化镉诱导的大鼠精子运动毒性及镉对附睾尾组织三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate ATP)酶的影响;减少大鼠睾丸扭转复位后双侧睾丸生殖细胞的凋亡,对扭转复位后的睾丸生殖细胞有保护作用。本实验通过建立ICR雄鼠麻醉后,咽后壁吸入不同浓度的DEP悬浊液的模型,模仿生物吸入大气中不同浓度柴油机尾气,观察DEP对育龄雄性ICR鼠生殖能力影响及黄芪注射液对染毒后育龄雄性ICR鼠生殖能力的干预作用。从精子密度,精子总活力,体外受精率,附睾,睾丸系数及其组织学上进行研究。从而加强我国在男性不育症与大气污染关系及中药干预男性不育症机理这一薄弱环节的研究,为临床中不明原因的不育症的干预提供一定的实验和理论基础。方法:5周龄ICR育龄雄鼠60只随机分为10组,每组6只。磷酸盐缓冲液组(phosphate buffer solution PBS组);染毒组:0.8μg/μl DEP,3.0μg/μl DEP,12.0μg/μl DEP;低剂量黄芪注射液干预组:0.8μg/μl DEP+10mg/ml黄芪注射液,3.0μg/μl DEP+10mg/ml黄芪注射液,12.0μg/μl DEP+10mg/ml黄芪注射;高剂量黄芪注射液干预组:0.8μg/μl DEP+20mg/ml黄芪注射液,3.0μg/μl DEP+20mg/ml黄芪注射液,12.0μg/μl DEP+20mg/ml黄芪注射液。染毒模型建立采用De Hennezel法。乙醚麻醉后,咽后壁吸入的方式ICR育龄雄鼠分别吸入30μL的PBS、12μg/μl、3μg/μl、0.8μg/μl DEP悬浊液。染毒组每日腹腔注射0.9%生理盐水1ml,黄芪注射液干预组每日分别腹腔注射10mg/ml、20mg/ml的黄芪注射液1ml。每周2次染毒连续4周,第6周处死。无菌条件下取出睾丸,附睾尾。右睾丸、附睾尾称重后,留用病理标本。左附睾尾留作获得精子的标本。检测并比较睾丸、附睾系数,睾丸曲细精管管壁厚度、附睾腺管壁厚度,精子密度、总活力,体外受精率;观察睾丸、附睾病理变化。结果:1、3μg/μl、12μg/μl DEP染毒组与PBS组、0.8μg/μl DEP染毒组比较精子密度、总活力、体外受精率、睾丸曲细精管管壁厚度和附睾腺管壁厚度明显变薄,附睾系数明显升高,有统计学差异(p≤0.05)。各组间睾丸系数无统计学差异(P＞0.05);3μg/μl、12μg/μl DEP黄芪注射液干预组与单纯3μg/μl、12μg/μl DEP染毒组间比较,精子密度、总活力、体外受精率、附睾系数、睾丸曲细精管管壁厚度和附睾腺管壁厚度存在统计学差异(p≤0.05)。浓度为10mg/ml、20mg/ml的黄芪注射液在改善DEP引起的检测指标上不存在剂量依赖关系(p＞0.05)。总活力和体外受精率之间呈正相关(P=0.000)。2睾丸组织学:PBS组、0.8μg/μlDEP组曲细精管管壁厚,细胞层次宽,腔内可见精子。3.0μg/μlDEP染毒组曲细精管上皮排列疏松,有些正常曲细精管旁可见萎缩曲细精管,萎缩曲细精管的生精上皮变薄,生精上皮细胞数量减少;12.0μg/μlDEP染毒组管壁明显变薄,曲细精管上皮排列松散。10mg/ml,20mg/ml黄芪注射液治与相应染毒组相比较,生精小管管壁增厚,特别是对3.0μg/μl、12.0μg/μl染毒组的干预,管壁增厚显著,细胞层次较宽,各级生精细胞排列较规则,腔内较相应的染毒组可见较多精子,曲细精管厚度有明显增加。3附睾组织学:PBS组和0.8μg/μlDEP染毒组附睾腺管上皮细胞排列紧密,高柱状上皮细胞纤毛清晰、游离缘整齐,分泌旺盛,管腔断面可见大量成熟精子。3.0μg/μl、12.0μg/μlDEP染毒组附睾管壁较薄,高柱状上皮退变、纤毛结构不清、游离缘模糊。管腔内成熟精子减少,严重者细胞坏死、管腔破裂、精子溢出。浓度为10mg/ml,20mg/ml黄芪注射液干预组与相应染毒组比较,附睾腺管壁厚度增加,3.0μg/μl、12.0μg/μl染毒组经干预后附睾腺管壁增厚显著(P≤0.05),附睾管壁厚度,纤毛分布情况,管腔内成熟精子的数目也有改善。结论:1 3.0μg/μl、12.0μg/μl DEP悬浊液造成育龄ICR雄鼠精子密度、总活力、体外受精率降低;睾丸曲细精管及附睾腺管壁厚度变薄;睾丸、附睾发生病理变化及附睾系数增大。2初步证实连续运用1ml的浓度为10mg/ml、20mg/ml黄芪注射液可以显著提高3.0μg/μl、12.0μg/μl DEP染毒组育龄ICR雄鼠的精子密度、总活力、体外受精率;促进睾丸、附睾组织病理修复,增厚睾丸曲细精管及附睾腺管壁厚度及降低附睾系数。但无剂量依赖关系。