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目的：采用自发性糖尿病肾病(Diabetic kidney disease, DKD) KKAy小鼠,对照药物为厄贝沙坦,观察糖肾平对DKD KKAy小鼠药效学和氧化应激水平的影响,并采用免疫组化、原位杂交和Western blotting方法观察糖肾平对DKD KKAy小鼠肾组织中Smad6、转化生长因子-β1 (Transforming growth factor-β1, TGF-β1)、BMP7、α-SMA、E-Cadherin蛋白及mRN A表达的影响。方法：1.糖肾平对DKD KKAy小鼠药效学的影响10只雌性C57BL/6J小鼠作为正常对照组。雌性10周龄KKAy小鼠60只,KK鼠配合饲料诱导10周后,血糖≥16.7mmol/L 24h尿蛋白≥0.4mg为糖尿病肾病动物模型。模型小鼠按血糖和体质量分层随机,分为模型组、厄贝沙坦组与糖肾平小、中、大剂量组,并进行相应药物的灌胃治疗。观察小鼠一般情况,检测体质量、24h尿蛋白定量。实验第26周,眼球取血,全血测血糖,分离血清,检测甘油三酯(Triglyeride, TG)、尿素氮(Blood urea nitrogen, BUN)、肌酐(Serum creatinine, Scr)含量；称取小鼠肾重,计算肾重体重比；肾组织石蜡切片行HE、Mallory染色观察肾组织病理形态变化。2.比色法生化仪检测血清中丙二醛(Malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)和一氧化氮(Nitric oxide, NO)水平。3.免疫组化：检测小鼠肾组织中TGF-β1、Smad6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达。4.原位杂交：检测小鼠肾组织中TGF-β1、Smad6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin mRNA表达。5. Western blotting:检测小鼠肾组织中TGF-β1、Smad6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达。6.实验数据用SPSS20.0软件进行统计学处理。结果：1.糖肾平对DKD KKAy小鼠药效学的影响与模型组比较,糖肾平小、中、大剂量组小鼠一般状态改善、体质量均有不同程度减轻,治疗16周后糖肾平中、大剂量组小鼠体质量明显减轻(P<0.01),肾质量与体质量比值显著降低(P<0.01),24h尿蛋白定量显著减少(P<0.01),血清BUN含量显著降低(P<0.01), TG、Scr含量降低(P<0.05),肾脏病理改变明显减轻。2.糖肾平对DKD KKAy小鼠氧化应激的影响与模型组比较,糖肾平小、中、大剂量组NO、SOD含量显著升高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01)。3.糖肾平对DKD KKAy小鼠肾组织T GF-β1、Smad6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达的影响免疫组化显示：正常对照组肾小管上皮细胞有少量TGF-β1、α-SMA蛋白表达,明显低于模型组(P<0.01)；与模型组比较,各治疗组肾小管上皮细胞TGF-β1、α-SM A蛋白表达均明显降低,有显著统计学差异(P<0.01)；且糖肾平大剂量组降低最明显。正常对照组肾小管上皮细胞胞浆Smad6、BMP7、E-Cadherin蛋白强阳性表达,明显高于模型组(P<0.01)；与模型组比较,各治疗组肾小管上皮细胞胞浆Smad6、BMP7蛋白表达明显增多,有显著统计学差异(P<0.01),糖肾平大剂量组肾小管上皮细胞胞浆E-Cadherin蛋白表达明显增多,有显著统计学差异(P<0.01),糖肾平小、中剂量组肾小管上皮细胞胞浆E-Cadherin蛋白表达增加,有统计学差异(P<0.05)。Western blotting显示：正常对照组肾组织少量表达TGF-β1和a-SMA,明显低于模型组(P<0.01)；与模型组比较,糖肾平中、大剂量组肾组织TGF-β1蛋白表达显著降低(P<0.01),糖肾平小剂量组肾组织TGF-β1蛋白表达降低(P<0.05),糖肾平大剂量组肾组织a-SMA蛋白表达显著降低(P<0.01),糖肾平中剂量组肾组织a-SMA蛋白表达降低(P<0.05),糖肾平小剂量组肾组织a-SMA蛋白表达降低,尚无统计学差异。正常对照组肾组织高表达Samd6、BMP7和E-Cadherin,明显高于模型组(P<0.01)；与模型组比较,糖肾平大剂量组肾组织中Smad6蛋白表达显著增加(P<0.01),糖肾平小、中剂量组肾组织中Smad6蛋白表达增加,有统计学差异(P<0.05),各治疗组肾组织BMP7蛋白的表达量均显著增加(P<0.01),糖肾平中、大剂量组肾组织E-Cadherin蛋白表达显著增加(P<0.01),糖肾平小剂量组肾组织E-Cadherin蛋白表达增加(P<0.05)。4.糖肾平对DKD KKAy小鼠肾组织TGF-β1、Smad6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin mRNA表达的影响原位杂交显示：正常对照组肾小管上皮细胞有少量TGF-β1、α-SMA mRNA表达,明显低于模型组(P<0.01)；与模型组比较,糖肾平中、大剂量组肾小管上皮细胞TGF-β1、a-SMA mRNA表达明显降低,有显著统计学差异(P<0.01),糖肾平小剂量组肾小管上皮细胞a-SMA mRNA表达降低,有统计学差异(P<0.05),TGF-β1 mRNA表达有所降低。正常对照组肾小管上皮细胞胞浆有大量Smad6、BMP7、 E-Cadherin mRNA表达,明显高于模型组(P<0.01)；与模型组比较,各治疗组肾小管上皮细胞胞浆Smad6 mRNA表达均明显升高,有显著统计学差异(P<0.01),糖肾平大剂量组肾小管上皮细胞胞浆BMP7、E-Cadherin mRNA表达明显升高,有显著统计学差异(P<0.01),糖肾平小、中剂量组肾小管上皮细胞胞浆BMP7、E-Cadherin mRNA表达升高,有统计学差异(P<0.05)。结论：1.糖肾平可以改善DKD KKAy小鼠的一般状态,减轻DKD KKAy小鼠体质量、肾重体重比、24h尿蛋白定量,减轻DKD KKAy小鼠肾脏病理损伤,糖肾平的治疗效果呈剂量依赖关系。2.糖肾平可以降低DKD KKAy小鼠血清MDA含量,升高NO、SOD含量,改善DKDKKAy小鼠氧化应激状态,从而保护肾功能。3.糖肾平可以减少肾组织TGF-β1、α-SMA蛋白及nRNA的表达,增加Smad6、 BMP7、E-Cadherin蛋白及mRNA的表达,从而逆转肾小管上皮细胞转分化。糖肾平改善DKD KKAy小鼠的一般状态,其对DKD KKAy小鼠肾脏保护及逆转肾小管上皮细胞转分化的作用,可能与下调氧化应激水平及调节TGF-β1/Smad6/BMP7信号通路有关,这为DKD“肾痿”假说提供了新的实验依据。