无糖代谢副作用HAART方案对SIVmac239感染北平顶猴的脂类代谢影响及初步机制研究

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目的:高效抗逆转录病毒疗法(Highly active antiretroviral treatment,HAART)会诱导机体产生严重的代谢异常,包括糖代谢异常和脂代谢异常。然而,HAART引起的糖代谢异常可以通过多种方式间接的影响类脂代谢。因此,本研究以北平顶猴AIDS模型为研究对象,选用对葡萄糖代谢没有不良影响的一线HAART治疗方案,以真实反映HAART对脂类代谢的影响,并初步探讨其作用机制。方法:根据联合国世界卫生组织(World Health Organization,WHO)推荐的艾滋病一线治疗方案,并查阅文献选择了三种对对葡萄糖代谢没有不良反应的药物,分别是替诺福韦(PMPA)、恩曲他滨(FTC)、拉替拉韦(RAL),简称PFR治疗。本研究分为感染前、感染后以及HAART后三个阶段,采用Cobas 8000全自动生化免疫分析仪检测了北平顶猴血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,以研究PFR治疗对全身脂类水平的影响,通过B型超声检测了北平顶猴腹部皮下脂肪组织的厚度,通过苏木精-伊红(HE)染色检测北平顶猴皮下脂肪组织形态学变化,以研究PFR治疗对局部脂类代谢的影响。并通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测北平顶猴血浆中炎症因子及脂肪细胞因子水平变化,以研究PFR治疗引起脂类代谢异常的全身机制;通过实时定量聚合酶链锁反应(q RT-PCR)检测PFR治疗对局部脂肪组织中炎症因子、脂肪细胞因子以及脂肪细胞代谢基因的影响,以研究PFR治疗引起脂类代谢异常的全身机制。结果:SIVmac239感染北平顶猴经PFR治疗后,出现明显的血脂异常,表现为TC、TG、LDL-C和HDL-C降低,皮下脂肪层出现严重的脂肪营养不良,表现为脂肪层厚度和脂肪细胞直径均减小,这与HIV感染者的临床症状相一致。对机制的结果显示PFR治疗可加重全身性的炎症反应,并引起瘦素、脂联素等脂肪细胞因子分泌紊乱。与之相比,PFR治疗没有引起局部脂肪组织的免疫微环境、脂类代谢基因等发生明显变化。并且,在治疗后,北平顶猴血浆中的病毒载量降低到检测线以下,但脂肪组织的病毒载量治疗前后无明显差异。结论:HAART可以直接引起血脂异常和脂肪营养不良,包括TC、TG、HDL-C、LDL-C降低,皮下脂肪萎缩。引起脂类代谢异常的主要原因可能是全身持续的炎症反应与脂肪细胞因子水平异常。此外,脂肪组织是HAART后重要的病毒储存库。
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