疟疾是全球最严重的三大传染病之一,威胁33亿居住在热带及亚热带地区人口的健康。由于早期发现和治疗不及时等因素已严重阻碍了对疟疾的防控,因此建立精确快速的诊断是有效控制疟疾的关键环节。目前应用的恶性疟疾快速诊断方法由于敏感性低于镜检法、特异性不高、易与类风湿因子发生交叉反应且对储存条件要求苛刻等原因,不能满足实际应用的需要。本论文针对上述问题,首次将人工随机重组多表位技术与禽类IgY抗体技术相结合,设计了一种全新的恶性疟疾诊断方法。通过构建随机串联人工多表位原核表达文库,经高通量筛选获得重组多表位抗原M.RC Ag-1和M.RC Ag-2,经免疫莱航鸡,诱导产生了极强的体液免疫反应,获得的卵黄IgY抗体能够有效识别天然疟原虫。以anti- M.RC Ag-1和anti- M.RC Ag-2的IgY抗体建立的双抗体夹心ELISA检测方法,对M.RC Ag标准品的检测极限达到1.95ng/ml,对培养的混合期和早期同步化处理的恶性疟原虫检测时,最低检出感染率分别为0.0001%和0.001%;32例经显微镜检诊断为恶性疟疾感染的患者全血中,用双抗体夹心ELISA法检测呈抗原阳性者为56.7%。此外,快速检测试纸条的试制品,对M.RC Ag标准品的检测极限达到10ng/ml,对培养的混合期恶性疟原虫虫体的最低检出率达到0.5%。本研究还优化了卵黄IgY抗体的层析纯化条件,比较不同佐剂的免疫效果及对IgY得率的影响,为最终建立疟疾早期快速诊断技术的新型研制平台,也为研制其它疾病尤其是突发传染性疾病的快速早期诊断试剂盒奠定坚实的基础。