【摘 要】
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三聚氰胺是一种在化工及材料领域应用较广泛的三嗪类含氮杂环有机化合物,然而近年来却被不道德商家非法添加到食品和动物饲料中用以提高粗蛋白含量。而摄入过量的三聚氰胺会严
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三聚氰胺是一种在化工及材料领域应用较广泛的三嗪类含氮杂环有机化合物,然而近年来却被不道德商家非法添加到食品和动物饲料中用以提高粗蛋白含量。而摄入过量的三聚氰胺会严重危害人类健康,因此需要探寻更可靠有效的方法来检测三聚氰胺。本论文基于三螺旋DNA的结构特点,分别采用均相电化学和荧光生物传感策略检测三聚氰胺。这两种方法都是通过DNA链中脱碱基位点(AP)来识别并结合三聚氰胺,从而诱导形成三螺旋DNA结构。其中,均相电化学检测方法采用了以核酸外切酶III(Exo III)为辅助的信号放大策略,通过释放信号分子亚甲基蓝(MB)增强电化学信号,从而实现了三聚氰胺的高灵敏检测,其检测限低至8.7 nM(1.1 ppb)。荧光检测方法则采用了依赖于 Mg2+的脱氧核酶(DNAzyme)为辅助的信号放大新方法,通过裂解标记有荧光基团与猝灭基团的信号DNA链使荧光恢复,从而实现了三聚氰胺的高灵敏检测,其检测限低至0.9 nM(0.1 ppb)。这两种新方法都具有高灵敏和高选择性检测三聚氰胺的突出优点,同时,在检测实际样品中的三聚氰胺时也都具有良好的实用性。因此,提出的这两种生物传感新方法成功实现了三聚氰胺的高灵敏、高选择性检测,并拓宽了三螺旋DNA在生物传感领域的应用范围。
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