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前胡属(Peucedanum L.)隶属伞形科(Umbelliferae/Apiaceae),广布于欧亚大陆和非洲,全世界有100-200种,中国有40种。一直以来前胡属是伞形科中鉴定及系统分类研究方面的困难类群。本文从叶表皮形态学和分子系统学两方面对前胡属的系统发育进行了初步研究,并运用DNA Barcoding技术对中药正品前胡进行了分子鉴定。主要研究结果为:
1.叶表皮形态研究
光学显微镜和扫描电子显微镜下对前胡属22种植物的叶表皮形态研究显示前胡属叶表皮形态在种级水平是一致的,故在种一级可用来区分植物。然而在组级水平几乎没有一致性,这表明传统前胡属分类系统有可能不自然,需要更多的证据加以订正。叶表皮形态的结果认为叶表皮形态和分子数据的证据同时认为石防风(Peucedanum terebinthaceum(Fischer ex Treviranus)Ledebour))应从前胡属分出去。武隆前胡(Peucedanum wulongense R.H.Shan&M.L.Sheh)和新拟种越南前胡(Peucedanum puanum J.Zhou& X.Gong)同南川前胡(Peucedanumdissolutum(Diels)H.Wolff)有较近的亲缘关系,前两者可与南川前胡归为一组;紫茎前胡(Peucedanum violaceumR.H.Shan& M.L.Sheh)应从组4近亮蛇床组转移至组1刺尖前胡组。
2.分子系统学
基于ITS序列对广义前胡属同其近缘种进行系统发育研究。运用最大简约法、最大似然法和贝叶斯法构建的系统树皆由三个主要分支组成,即东亚前胡分支、狭义前胡分支和当归分支。结果显示当归属(Angelica L.)为单系类群,而东亚地区的前胡属植物同狭义前胡属并没有紧密的亲缘关系,当归属和广义前胡的系统发育关系有待进一步深入研究。分子系统学研究表明传统的前胡属属下分类系统不自然,一些原本不在同一个组的种在系统树中聚为姊妹类群或近缘类群,如北京前胡(Peucedanum caespitosum H.Wolff)和刺尖前胡(Peucedanum elegansKomarov),红前胡(Peucedanum rubricaule R.H.Shan&M.L.Sheh)和滇西前胡(Peucedanum delavayi Franchet)等。采自越南的前胡属新拟种-越南前胡确为前胡属植物,而且系统发育研究显示越南前胡同华中前胡、南川前胡和广西前胡构成姊妹类群,显示四者较近的亲缘关系。
3.正品前胡的DNA barcoding分子鉴定
正品前胡是一味重要的中国传统中药,正品前胡的植物体为前胡属的前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn),通常称为白花前胡,现代中药市场有越来越多的地方前胡品种和前胡混用品或伪品,形态学和化学方法对前胡类药品有一定的局限性。本研究应用四个DNA分子片段:ITS,matK,rbcL和psbA-trnH来区正品前胡同前胡地方品种、前胡混用品及伪品。研究结果显示:1)ITS在正品前胡和其他非正品前胡间有较大变异,足以将它们区分开来,因此ITS序列可作为正品前胡DNA Barcoding分子鉴定的合适片段;2)原来作为正品前胡的紫花前胡现在可作为地方前胡品种;3)长前胡和泰山前胡可作为正品前胡的首选替代种源;4)滨海前胡(Peucedanum japonicum Thunberg)不应处理为正品前胡的混用品而应作为地方前胡品种。