论文部分内容阅读
第一部分乌司他丁和泰索帝对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭的抑制以及对uPA、uPAR、ERK的表达的影响目的:探讨乌司他丁(UTI)和泰索帝(TXT)对体外培养的MDA-MB-231细胞(ER-)的增殖及侵袭能力的作用,以及对该细胞中的uPA(尿激酶型纤溶酶原激活物)、uPAR(尿激酶型纤溶酶原激活物受体)、ERK(细胞外信号调节激酶)表达水平的影响。方法:将MDA-MB-231细胞分为4组:对照组(Control),乌司他丁组(UTI,浓度800U/ml),泰索帝组(TXT,浓度3.7μg/ml),乌司他丁+泰索帝组(UTI,浓度800U/ml ,TXT,浓度3.7μg/ml)。运用噻唑蓝(MTT)法检测以上各处理组细胞的增殖能力,Transwell小室侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RQT-PCR)分别检测各组细胞中uPA、uPAR、ERK的mRNA表达水平,免疫印迹实验(Western Blot)检测uPA、uPAR、p-ERK的蛋白表达水平。结果:MDA-MB-231细胞在Control, UTI, TXT, UTI+TXT各组中的增殖能力和侵袭能力均依次降低。uPA和uPAR的基因及蛋白表达水平均可被UTI抑制,而被TXT上调;UTI和TXT对ERK的基因表达无明显作用,但UTI对ERK的激活有抑制作用,而TXT对ERK的激活有促进作用。结论:乌司他丁可抑制MDA-MB-231细胞的uPA、uPAR、p-ERK表达,并可增强泰索帝的抗癌细胞增殖及侵袭的作用。第二部分乌司他丁和泰索帝对乳腺癌细胞MDA-MB-231裸鼠移植瘤生长的抑制及对uPA、uPAR、p-ERK表达的影响目的:探讨乌司他丁(UTI)和泰索帝(TXT)对MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤的生长的影响,以及对瘤组织中的uPA、uPAR、p-ERK表达水平的影响。方法:建立裸鼠移植瘤模型,分四组:对照组(Control,生理盐水200μl/天/只),乌司他丁组(UTI,1600U/天/只),泰索帝组(TXT,10mg/7天/kg),乌司他丁+泰索帝组(UTI+TXT,按单药剂量及频次给药)。用药期间检测肿瘤体积,并绘制肿瘤生长曲线。用药21天后处死裸鼠,取肿瘤组织做病理切片及免疫组织化学实验,检测uPA、uPAR及p-ERK的蛋白表达。结果:实验结束时对照组及UTI组各有一只裸鼠死亡。整个实验过程中,对照组及UTI组裸鼠移植瘤无缩小,TXT及UTI+TXT组自用药第13天开始至用药结束肿瘤体积逐渐缩小。抑瘤率分别为:UTI组29.312%,TXT组86.021%,UTI+TXT组98.264%。uPA、uPAR及p-ERK的蛋白表达水平均可被UTI抑制,而被TXT上调,两者联用仍可下调三种蛋白,但下调程度较单用UTI弱。结论:乌司他丁可抑制MDA-MB-231细胞移植瘤中的uPA、uPAR及p-ERK的蛋白表达,并可增强泰索帝抗肿瘤生长的作用。