银—磷酸三钙纳米粒/海藻酸盐抗感染材料研究

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 | 被引量 : 6次 | 上传用户:wqh4975156
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感染常常发生在烧创伤病人身上,受损伤的皮肤不能够维持它的保护作用,微生物很容易通过受损皮肤侵入人体内并形成菌落,影响人体健康甚至威胁生命。虽然抗生素的使用对于防治伤口感染意义重大,但是细菌对于抗生素的抵抗性变得越来越普遍。寻找新型抑菌剂代替抗生素很有必要。纳米银比表面积大,表面活性高,容易跟微生物接触,在抑菌方面具有得天独厚的优势。在相同银含量下,它的抑菌性要强于离子态的银。不同于传统的抗生素,纳米银在较低浓度下依然具有抑菌性,对人体无毒性,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌共数十种致病微生物均有强烈的抑制作用,且具有持久的抑菌性。为防止纳米银团聚或沉淀现象的发生,通常需要采用有机或无机材料作为稳定剂。海藻酸钠是一种天然的碱性多糖,由甘露糖醛酸(M单元)与古罗糖醛酸(G单元)组成。它价格低廉,毒性低,生物相容性和生物可降解性良好,能与二价阳离子结合形成水凝胶。海藻酸钠可以作为纳米银生成过程中的还原剂和稳定剂,海藻酸分子链上含有大量的羟基和羧基,羟基能将Ag+还原为纳米银,羧基能同Ag+发生静电相互作用形成复合物。虽然纳米银可以有效抑菌,但是过高的银含量可能对人体有毒。众所周知,生物体都需要利用微量元素,如钙离子、磷酸盐等。β-磷酸三钙是一种常用的生物医用材料,可以被生物体降解为Ca2+和PO43-。本研究拟采用β-TCP微粒与纳米银复合制成银-磷酸三钙(Ag-TCP)纳米粒,将纳米银均匀分布在β-TCP微粒的表面,一方面稳定纳米银,防止团聚现象发生,另一方增强材料的抑菌性。海藻酸钙水凝胶可以通过冷冻干燥技术制成海藻酸钙冻干膜。冻干膜具有三维网状的多孔结构,吸液性强,能维持创面湿润的环境,并且能通过离子交换释放钙离子,促进伤口血液凝固。虽然冻干膜具有这些优点,但是其本身不具有抑菌性,渗出液多的伤口会增加感染的几率,这大大限制了冻干膜在创伤敷料领域的应用。本研究拟通过将银-磷酸三钙纳米粒同海藻酸钙冻干膜结合,期望得到一种吸液性高且抑菌性强的创伤敷料。本研究首先采用光化学还原法制备了纳米银/海藻酸钠溶胶,并对其抑菌性进行了评价。其次,利用共混法制备出银-磷酸三钙纳米粒,并以其为抑菌剂,海藻酸钙冻干膜为基底材料,制备出银-磷酸三钙/海藻酸钙冻干膜,并对冻干膜的物理性能和抑菌性能进行了评价和测定。本课题主要内容和结论如下:第一部分是纳米银溶胶的制备与抑菌性能研究。以海藻酸钠为还原剂和稳定剂,硝酸银为前驱体,紫外光照条件下制备出纳米银溶胶。采用紫外-可见分光光度计(UV-vis)、场发射透射电子显微镜(TEM)、X射线衍射仪(XRD)、红外光谱仪(FTIR)、激光纳米粒度仪(DLS)等仪器对纳米银的物理性能进行了检测与评价,同时采用抑菌圈实验对其抑菌性进行了评价。结果表明,以海藻酸钠为还原剂和稳定剂可以生成粒径均一、稳定的银纳米粒子,形状为球形或类球形,粒径大小在1~5nm之间,对革兰氏阴性菌大肠杆菌和革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌均有较好的抑菌性。第二部分:银-磷酸三钙纳米粒的制备。采用化学共沉淀法,高温灼烧成功制备出纯相的β-磷酸三钙(β-TCP)微粒。XRD结果表明前驱体是缺钙型羟基磷灰石,经高温煅烧后生成的是纯相的β-TCP,无其他衍射峰的出现。FTIR分析表明煅烧后产物存在磷酸根对应的吸收峰,而前驱体HPO42-对应的吸收峰消失,说明煅烧后产物没有HPO42-存在,反应产物为β-TCP微粒。TEM显示β-TCP微粒呈棒状,长约200~300nm,有一定团聚现象的发生。β-TCP微粒与光化学还原法制备的纳米银/海藻酸钠溶胶共混,成功制备出银-磷酸三钙纳米粒。XRD结果表明复合微粒含有面心立方构型的纳米银。FTIR结果显示银-磷酸三钙纳米粒同β-TCP相比,只是磷酸根对应吸收峰的强度减弱,纳米银与β-TCP均维持了各自结构的稳定。TEM显示银纳米粒子粒径在2~5nm之间,且均匀分布在β-TCP微粒表面。第三部分:银-磷酸三钙纳米粒/海藻酸钙冻干膜制备与性能研究。采用冷冻干燥技术,成功地以银-磷酸三钙纳米粒/海藻酸钠溶液制成具有抑菌性的银-磷酸三钙纳米粒/海藻酸钙冻干膜。采用场发射扫描电镜(SEM)对其内部结构进行了观察,采用红外光谱仪和X射线衍射仪对其基团变化和结晶性等进行评价,检测了冻干膜的吸液性和保液性,另外还通过抑菌圈法和平板菌落计数法对其抑菌性进行了评价。结果表明,冻干膜具有三维网状多孔结构,吸液性强,对蒸馏水和生理盐水的吸液率能达到20g/g和21g/g,同时冻干膜也具有一定的保液性,能够吸收大量的伤口渗出液,维持创面湿润的环境,促进伤口愈合。银-磷酸三钙纳米粒组分的加入,使冻干膜具备良好的抑菌性。综上所述,本研究成功制备了纳米银/海藻酸钠溶胶,方法简便,环境污染小,制备的纳米银稳定性强,粒径小,对革兰氏阴性菌大肠杆菌和革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌均有较好的抑菌性,这为研制绿色环保的抑菌剂提供了参考。同时,采用共混法制备出银-磷酸三钙复合微粒,并以其为抑菌剂,海藻酸钠为基底,制备出银-磷酸三钙纳米粒/海藻酸钙冻干膜。该冻干膜具有三维网状多孔结构,吸液性和保液性强,能够维持创面湿润的环境,并且具有良好的抑菌性,在抗感染领域有潜在的应用价值。
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