目的 应用间接免疫荧光方法，以不同动物及人组织为底物检测大疱性皮肤病的循环抗体沉积情况，从中筛选出敏感性强且容易获取的底物，为天疱疮、大疱性类天疱疮靶抗原分子水平的研究，如免疫印迹研究，靶抗原的表位研究等提供材料来源。 方法 一、实验材料： 1．病例资料： 天疱疮患者血清10例，大疱性类天疱疮患者血清5例，所有病例均来自中国医科大学第一临床学院皮肤科，均经临床、病理及免疫病理证实。 2．对照资料： 正常人血清3例。来自本院血库健康献血员。以上血清均以每份20μl分装后置于-30℃冰箱保存待检。 3．底物资料： 实验所需动物(豚鼠、小鼠、大鼠、家兔)均购自中国医科大学动物实验中心，断颈处死后分别取食道、小肠、膀胱、舌等组织，切成0.8×0.8cm大小，立即OCT包埋，液氮速冻，置于-70℃冰箱中保存备用。正常人皮肤取自本院外科整形手术切除多余的皮肤，人脐带取自解放军第二零二医院产房，均用上述方法保存备用。 4．试剂：FIFC标记的羊抗人IgG抗体，稀释为1：80。 二、染色方法：间接免疫荧光技术，荧光染色。 三、观察指标：观察循环抗体沉积的部位及荧光强度，在血清被稀释成1：10时，见细胞间荧光抗体结合或基底膜带见均质线状荧光为阳性。 四、记分方法：天疱疮细胞间和基底膜带荧光图形强度很强，耀眼者得3分，比较强者得2分，较弱者得1分，很弱但可辩认者得0.5分。所有记分均经两个人先后完成，‘取两次结果的平均值。 五、统计及显著性检验:t检验。结果 1.将10例待检天疙疮患者血清稀释为1:10时，各底物得分最高者为兔舌和兔食道(均为22分)。 2.将10例待检天疙疮患者血清稀释为1:20时，兔舌和兔食道作底物得分最高者为兔食道(20分)。 3.将5例待检大疤性类天疙疮患者血清稀释为1:10时，各底物得分最高者为豚鼠舌(14分)。 4.3例正常人血清稀释为1:10时，各种底物间接免疫荧光检测均为阴性。 5.将10例待检天疙疮患者血清按1:10、1:20等作倍比稀释，分别以兔食道和正常人皮肤为底物检测天疤疮抗体滴度，二者敏感性无显著性差异(P>0 .5)。结论 1.兔食道为用间接免疫荧光法检测循环天疙疮抗体的最敏感底物，其敏感性与用人皮肤为底物时无明显差异(P>0.5)。兔舌、豚鼠舌、豚鼠食道、小鼠食道也可用作一般常用性底物。 2.豚鼠舌为用间接免疫荧光法检测基底膜带抗体的最敏感底物，小鼠食道、大鼠膀胧、兔舌也可作为一般常用性底物。 本研究结果表明，兔食道和豚鼠舌可取代正常人皮肤和猴食道粘膜作底物，用于大疤性皮肤病的研究。因二者易于大量获取，可从中大量提取桥粒成份，为天疙疮、类天疙疮靶抗原分子水平的研究提供材料来源。