恩拉霉素(enduracidin)是由土壤中分离出来的放线菌Streptomyces fungicidious No.B5477 发酵产生的一种由 17 个氨基酸分子和不饱和脂肪酸组成的多肽类抗生素。它以稳定性高,毒性小、低残留,同时具有广谱抗菌活性而作为一种全新的饲料添加剂广泛应用在畜牧业中。本文对StreptomycesfungicidiousL-609菌株发酵产恩拉霉素进行了初步研究,主要包括基因组重排选育恩拉霉素高产菌株、金属离子对恩拉霉素产生菌生长代谢及恩拉霉素合成的影响等内容。经过五轮原生质体融合筛选选育最终得到5株融合高产菌株EL-10、EL-12、EL-18、EL-22、EL-30,其恩拉霉素效价分别达到 1950.8 mg/L、1796.4 mg/L、1834.9 mg/L、1234.1 mg/L、1954.5 mg/L,分别是出发菌株L-35的4.62倍、4.23倍、4.35倍、2.92倍和4.63倍。在遗传稳定性试验中,融合菌株经5次传代遗传性能稳定,表现出较高的工业应用潜力。高产融合菌株EL-30在3.7 L发酵罐上进行发酵试验,其恩拉霉素产量达到2.66 g/L。金属离子 Mn2+,Zn2+,Cu2+,Co2+.Mu6+对S.fungicidious EL-30菌株生长及恩拉霉素的生物合成具有影响。挑选对恩拉霉素有明显促进作用的Mn2+作为研究对象,研究其对恩拉霉素发酵代谢的影响。继而,以有机酸、氨基酸测定为分析对象,较系统地研究了金属离子Mn2+影响恩拉霉素代谢的机理。从氨基酸的角度,揭示了发酵初期添加Mn2+促进产物合成的原因,即促进了各种前体氨基酸:精氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、苏氨酸、酪氨酸的合成,丰富了恩拉霉素合成的前体库。有机酸HPL C测定结果表明在发酵初期添加2 mmol/L Mn2+后,恩拉霉素产生菌初级代谢过程中的丙酮酸和TCA循环中的有机酸及莽草酸的合成得到加强,强化了氨基酸生物合成前体物质的供应,从而丰富了恩拉霉素合成的前体库。金属离子Mn2+对恩拉霉素产生菌在液体深层培养基中形态分化也存在较大影响。实验结果表明:未添加Mn2+摇瓶中的菌丝团较致密,菌丝球直径也较大,144-156 h菌丝分化断裂现象严重;添加Mn2+摇瓶中的菌丝球较疏松,直径也较小,有利于氧气和营养物质在菌丝球内部传递,144-156 h菌丝无明显分化断裂现象,其稳定期较长,有助于次级代谢产物的积累。